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主题：【求助】进样量不一样，为什么峰分不开？（已经解决了O(∩_∩)O~感谢各位）

浏览0 回复16 电梯直达
石头底下的蛐蛐
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发表于：2011/09/10 16:27:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求助一下  安捷伦的1100  手动进样，定量环是20ul    前一段时间，因为进10ul  峰面积老是差挺大的  所以进20ul   
  没想到的是我把溶液稀释老多倍了  进20ul  竟然有三个峰分不开    然后又把这个溶液分别进了10ul  15ul  发现都能分开 为什么啊？好奇怪啊，不知是为什么  。乞求解决。

这个是进样10ul  15ul 的图片

这是进样20ul的图片

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有水有渝
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2011/9/10 16:48:45 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相是什么，样品溶剂又是什么？
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石头底下的蛐蛐
shitoudixiadequ
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2011/9/10 17:27:50 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
流动相是什么，样品溶剂又是什么？


样品溶剂是甲醇

我用的是梯度洗脱，
0min    甲醇是20%            0.3%的磷酸水80%
5min      20                80
10min        32                68
20min            45                55
40min                68                  32

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2011/9/10 17:34:30 Last edit by shitoudixiadequ
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2011/9/10 18:04:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议：
1、调节流动相的起始有机相比例，降低有机相比例，增强保留。
2、适当降低样品中有机相的比例。
这个属于样品中化合物的分相。
该帖子作者被版主 shitoudixiadequ加 5积分， 2经验，加分理由：建议很好，使问题解决了！加分！
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蓝人
yuxiaofeng86
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2011/9/10 18:06:25 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 石头底下的蛐蛐(shitoudixiadequ) 发表:

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
流动相是什么，样品溶剂又是什么？


样品溶剂是甲醇

我用的是梯度洗脱，
0min    甲醇是20%            0.3%的磷酸水80%
5min      20                80
10min        32                68
20min            45                55
40min                68                  32


我估计应该是跟PH有关系
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huxiaokang
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2011/9/10 18:25:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
PH也是影响样品中化合物在两相中的溶解度，这也是一个方法。
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zhaohua8011
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2011/9/10 20:31:22 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度大，手动进样，若操作稍有不甚就有很大影响！
进样体积过大，会导致峰展宽，导致过载，进而引起不能分开，建议改变浓度和进样体积使合理！
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2011/9/10 20:33:02 Last edit by zhaohua8011
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2011/9/10 21:20:51 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huxiaokang(huxiaokang) 发表:
建议：
1、调节流动相的起始有机相比例，降低有机相比例，增强保留。
2、适当降低样品中有机相的比例。
这个属于样品中化合物的分相。


你的意思是  让我把水的比例调大一点是吗？
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石头底下的蛐蛐
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2011/9/10 21:22:54 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
浓度大，手动进样，若操作稍有不甚就有很大影响！
进样体积过大，会导致峰展宽，导致过载，进而引起不能分开，建议改变浓度和进样体积使合理！


我已经把浓度稀释的很低了，那只能是体积的事了  但是进10ul的话    峰面积又不准了  咳  很无奈
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2011/9/10 22:45:54 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 石头底下的蛐蛐(shitoudixiadequ) 发表:
原文由 huxiaokang(huxiaokang) 发表:
建议：
1、调节流动相的起始有机相比例，降低有机相比例，增强保留。
2、适当降低样品中有机相的比例。
这个属于样品中化合物的分相。


你的意思是  让我把水的比例调大一点是吗？


梯度起始的水相比例调大一点，增加化合物的保留，或者溶解样品时用50％的有机相（溶解度允许的话），建议都试试。
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2011/9/11 8:52:43 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huxiaokang(huxiaokang) 发表:
原文由 石头底下的蛐蛐(shitoudixiadequ) 发表:
原文由 huxiaokang(huxiaokang) 发表:
建议：
1、调节流动相的起始有机相比例，降低有机相比例，增强保留。
2、适当降低样品中有机相的比例。
这个属于样品中化合物的分相。


你的意思是  让我把水的比例调大一点是吗？


梯度起始的水相比例调大一点，增加化合物的保留，或者溶解样品时用50％的有机相（溶解度允许的话），建议都试试。


好的 谢谢  我的样品就是用70%的甲醇提取的    后来用甲醇溶解的    总有一部分的渣渣
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