标准曲线:
分别移取混合标准储备液25μL, 50 μL, 100 μL, 250 μL , 500 μL 及1000 uL到6个10 mL容量瓶中,每个容量瓶移入50uL内标工作液,用乙腈定容。各标准工作溶液的浓度分别为0.025ug/mL, 0.05ug/mL, 0.1ug/mL, 0.25ug/mL, 0.5ug/mL, 1.0ug/mL。本实验采用空白试样基体匹配标准曲线来减小基质的干扰。 分别移取上述标准工作溶液200uL和200uL空白样品提取溶液混合,并用乙腈定容至1mL. 各溶液浓度分别为0.005ug/mL, 0.01 ug/mL, 0.02 ug/mL, 0.05 ug/mL, 0.1 ug/mL, 0.2 ug/mL. 分别对这些标准溶液进行
LC-MS/MS分析,并对各标样峰面积与内标的峰面积的比值(y)和其浓度(x)进行线性回归分析,得到标准曲线。
样品:
称取1 g样品(加了10ug/mL的标液100uL,相当于样品中的浓度是1ug/g)于50mL具盖离心管中,加入10mL水,振荡直至样品被水充分浸润。静置10 min。移取10 mL乙腈到离心管中,并加入50uL内标溶液,超声10min。然后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠,立即于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡 2min,然后以4000 rpm离心10 min。移取样品提取上清液1 mL于1.5 mL离心管中,加入150mg无水硫酸镁及25mg PSA吸附剂,于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm振荡2 min,以6000 rpm 离心2分钟。吸取上清液200μL,用乙腈稀释至1mL,经0.45洀有机相滤膜过滤,用
LC-MS/MS检测;
回收率怎么计算:仪器api4000,标准曲线的横坐标是以上标液的浓度5,10,20,50,100,200ng/mL. 最后定量得到的样品浓度是45ng/mL. 是45*5*10 呢 还是45*%*20 还是怎么样呢