主题：【原创】每周一毒贴之---真菌毒素专题（3）赭曲霉毒素

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发表于：2011/12/26 16:13:28 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还是没来得及一周一贴，不过我也学了一招，我也一次写一些，争取一周内完成一个帖子，这样的话也能不断进行改进。

每周一毒贴之---真菌毒素专题（3）赭曲霉毒素

ps：赭曲霉毒素是仅次于黄曲霉毒素之后对人类危害第二位的真菌毒素哦，大家不妨多了解了解

1、基本信息：

赭曲霉毒素（ochratoxin OT）是由赭曲霉、绿青霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉和碳黑曲霉所产生的有毒次生代谢产物。赭曲霉毒素主要由赭曲霉毒素A,B,C等多种毒素（据说是有7种之多）组成。其结构类似于香豆素。

先上一结构，如下图所示，为赭曲霉毒素A的结构（也是我自己画得哦）。OTB是OTA的脱氯衍生物，OTC是OTA的乙基酯。

赭曲霉毒素微溶于水，溶于有机溶剂和稀的碳酸氢钵水溶液(如5％碳酸氢钠)中。在紫外光下OTA呈兰绿色荧光(333nm)，OTB呈兰色(318nm)，OTC呈亮绿色。

真是好久不更新了……

2、毒性及危害：

赭曲霉毒素A是这么多种赭曲霉毒素中毒性最大的一种，研究发现，赭曲霉毒素A可损害动物肝脏及肾脏，有致畸及致癌作用，还有一种说法是，猪是赭曲霉毒素A的最敏感的损害动物，主要是损害猪的肾。（但不要忘记，对人的损害也是很大的哦）。

另有一点提到的是影响赭曲霉毒素A产生的因素：有文献报道很多因素可以影响OTA在液体培养基上的产量，氮源就是其中一个影响因素，氨基酸（尤其是谷氨酸和脯氨酸）花粉等的添加可以增加赭曲霉毒素A的产量。

另据报道，丙酸钠，重亚硫酸钠等可以抑制赭曲霉毒素A的产生。

3、易污染物及各国限量标准：

容易污染赭曲霉毒素A的产品包括：大麦小麦黑麦燕麦（麦芽），玉米（以及上述产品生产的饲料），大豆，绿豆，咖啡豆，酒葡萄汁（与葡萄相关的产品可能都会有哦），调味品（也就是香辛料），草本植物（有文献报道，甘草等药用植物也会比较容易污染），猪肾（建议大家猪的代谢器官还是少吃为好）。

各国限量标准不一，谷物及人类食用的产品一般限量1-5μg/kg，如中国，法国，奥地利等国家的谷类及豆类的限量标准为5μg/kg。饲料类限量要高一些，如瑞典猪用饲料喂100μg/kg，其他饲料200μg/kg，中国的配合饲料中的赭曲霉毒素A的限量标准也是100μg/kg。

4、检测方法：

主要的分析方法还是包括：薄层色谱法，酶联免疫法，荧光光度计法，液相色谱法，液质联用等。

薄层色谱是在365nm紫外灯下观察，前处理是液液萃取，确实是费事了一点，这个方法好像真的是用的很少了，近几年的文献很少看到了。

酶联免疫法应该算是个快速筛选的方法吧，但是似乎是假阳性记过特别多，初筛还是不错的。

还是主要讲讲液相色谱法，说到液相色谱法，就不得不说说前处理，前处理的好坏是影响真菌毒素（算是痕量检测吧）检测非常重要的一点。

目前液相色谱法采用的前处理方法主要包括硅藻土柱，C18，弗罗里硅土，苯基，氰基柱，SAX，复合柱如Mycosep229，Puritox 13以及免疫亲和柱。免疫亲和柱特异性最强，因此净化效果相对较好，而离子交换柱比硅藻土柱和Cl:柱的特异性更强，由于离子交换柱价格较低，是无条件使用免疫亲和柱的实验室进行OTA柱色谱净化的首选。

如：GB/T 5009.96-2003 谷物和大豆中赭曲霉毒素A的测定采用的就是液液萃取+薄层色谱法，适用小麦、玉米和大豆的检测，检测限为10μg/kg。

GB/T23502-2009食品中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法，采用免疫亲和柱+液相色谱的方法，适用于粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中赭曲霉毒素A，方法法检出限：粮食和粮食制品的检出限为1μg/kg,酒类的检出限为0.1μg/kg,酱油、醋、酱及酱制品的检出限为0.5μg/kg。

免疫亲和柱+荧光光度法，此方法处理方法与上述方法类似，方法检测限为1μg/kg。

GB/T 25220-2010 粮油检验，粮食中的赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法和荧光光度法，采用的特异性较好的两种前处理方法：免疫亲和柱及离子交换柱（如下图所示检测限分别为免疫亲和柱法为1μg/kg，离子交换柱为0.8μg/kg)，离子交换柱操作相对复杂一点，但是检测限相对较低，有利于低含量的样哦的检测……

另有复合材料基质的多功能净化柱法，如romer mycosep系列等测定谷物，葡萄干，生咖啡豆，红葡萄酒中的赭曲霉毒素A，由于此方法的最大特点是采用吸附杂质的模式，处理速度相对较快，不同基质的检测限的范围大约在2-4μg/kg之间。

来一个免疫亲和柱净化，HPLC-FLD图谱：