生物样品污染的柱子的清洗方法

G1%的乙酸水溶液

G1%的三氟乙酸水溶液

G0.1%四氢呋喃/正丙醇= 40/60（需降低流速）

G三乙胺/正丙醇= 40/60（混合前用磷酸调pH至2.5）

G或者：将色谱柱反转，与检测器断开，用5倍柱体积的100%异丙醇清洗，然后使用3~5倍柱体积的二氯甲烷，3~5倍柱体积的异丙醇，最后再返回原始的溶剂体系

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2012/3/15 10:31:17 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

没有预柱吗?做生物样品最好用预柱.

方法一、用水-乙腈-50%的异丙醇-乙腈-水冲冲

方法二、用磷酸盐缓冲液：乙腈（50：50）在约40度条件下反洗色谱柱

用黏度大的溶剂冲洗柱子
多用预柱比较好
经常更换预柱，因为大多数的生物样品堵塞柱子的影响是不可逆转的

我建议用以下的方法再生色谱柱：
1 首先将柱子反方向接好
2 然后按照水-甲醇-异丙醇-二氯甲烷-异丙醇-甲醇-水的顺序各冲10min
3 正接色谱柱，用流动相平衡
注意：方法中所用流动相为色谱纯。
可以在冲洗过程中开适当的柱温。
试试吧！

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2012/3/15 10:32:27 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

另外还需要注意：
不能随便反冲哦，有些柱子是不能反冲的！
先看看柱子的说明书在决定！

纯水冲柱也是要很谨慎的！不知你用的是什么柱子？

我的反相柱是先用10％乙腈冲0.6ml/min 20min，再用100％乙腈0.8ml/min 冲15分钟，最后用50－60％乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

每天进完样都要保养哦！不要怕麻烦．这样对柱子很有用的！
如嫌乙腈贵也可用甲醇代替！

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dahua1981

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2012/3/15 10:34:14 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
另外还需要注意：
不能随便反冲哦，有些柱子是不能反冲的！
先看看柱子的说明书在决定！
纯水冲柱也是要很谨慎的！不知你用的是什么柱子？

我的反相柱是先用10％乙腈冲0.6ml/min 20min，再用100％乙腈0.8ml/min 冲15分钟，最后用50－60％乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

每天进完样都要保养哦！不要怕麻烦．这样对柱子很有用的！
如嫌乙腈贵也可用甲醇代替！

一看您就很有这方面的经验

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happy爱米粒

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2012/3/15 11:54:07 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
没有预柱吗?做生物样品最好用预柱.

方法一、用水-乙腈-50%的异丙醇-乙腈-水冲冲

方法二、用磷酸盐缓冲液：乙腈（50：50）在约40度条件下反洗色谱柱

用黏度大的溶剂冲洗柱子
多用预柱比较好
经常更换预柱，因为大多数的生物样品堵塞柱子的影响是不可逆转的

我建议用以下的方法再生色谱柱：
1 首先将柱子反方向接好
2 然后按照水-甲醇-异丙醇-二氯甲烷-异丙醇-甲醇-水的顺序各冲10min
3 正接色谱柱，用流动相平衡
注意：方法中所用流动相为色谱纯。
可以在冲洗过程中开适当的柱温。
试试吧！

呵呵，应该是保护住哦，跟预柱概念是不一样的

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2012/3/15 11:56:55 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
另外还需要注意：
不能随便反冲哦，有些柱子是不能反冲的！
先看看柱子的说明书在决定！
纯水冲柱也是要很谨慎的！不知你用的是什么柱子？

我的反相柱是先用10％乙腈冲0.6ml/min 20min，再用100％乙腈0.8ml/min 冲15分钟，最后用50－60％乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

每天进完样都要保养哦！不要怕麻烦．这样对柱子很有用的！
如嫌乙腈贵也可用甲醇代替！

现在很多C18柱子都可以耐受100%的水，不过为了安全，还是不要超过90%水相。

反冲当然是不建议的，那是破釜沉舟的选择

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2012/3/15 11:58:30 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
另外还需要注意：
不能随便反冲哦，有些柱子是不能反冲的！
先看看柱子的说明书在决定！
纯水冲柱也是要很谨慎的！不知你用的是什么柱子？

我的反相柱是先用10％乙腈冲0.6ml/min 20min，再用100％乙腈0.8ml/min 冲15分钟，最后用50－60％乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

每天进完样都要保养哦！不要怕麻烦．这样对柱子很有用的！
如嫌乙腈贵也可用甲醇代替！

大部分情况甲醇是可以替代乙腈的，而且长期使用乙腈有可能对设备某些部件或管路造成侵蚀。但是两种溶剂选择性不同，乙腈还是必要的，应该备用

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