主题:【咨询】样品从分析到制备后的现象分析

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lixuesw
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请问各位做过样品纯化的砖家,帮小的分析一下下面这个情况的原因吧。
我在色谱上样品能分析出来,但是在专门的制备仪器上却没有峰出现了?
请问是样品量太小,柱子对样品形成了死吸附,还是检测器选错了,我做的样品是蛋白或者核酸偶联的纳米材料,检测器都是用的紫外的。
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xiongbb
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分析的柱子和制备柱填料一样么?用的流动相比例呢?
valentinayuan
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如果是蛋白样品的话紫外检测器肯定没问题,因为蛋白分子中有芳香族氨基酸在280nm处有特征吸收,会不会是上样量太小导致
belindayy
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可以考虑几个方面:上样量;是不是特征吸收,波长是否合适;用什么溶剂,是不是溶剂有吸收
lixuesw
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用的柱子是一样的 
流动相是缓冲盐、乙腈
原文由 xiongbb(xiongbb) 发表:
分析的柱子和制备柱填料一样么?用的流动相比例呢?
lixuesw
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有这种可能,但是可以用单独的紫外检测器检测出蛋白的存在,可是在制备仪器上没有峰
原文由 valentinayuan(valentinayuan) 发表:
如果是蛋白样品的话紫外检测器肯定没问题,因为蛋白分子中有芳香族氨基酸在280nm处有特征吸收,会不会是上样量太小导致
lixuesw
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上样量小,但是是特征吸收,波长合适的280,用的溶剂也合适,在色谱和紫外检测下都能检测出来
原文由 belindayy(belindayy) 发表:
可以考虑几个方面:上样量;是不是特征吸收,波长是否合适;用什么溶剂,是不是溶剂有吸收
valentinayuan
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