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主题：【求助】液相分离氨基酸时峰老是向前飘

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season2012
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发表于：2012/04/05 16:12:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近用安捷伦的反相C18水相柱分离氨基酸时，老出现峰前半段的峰往前飘且峰型也不正常，后面的峰保留时间和锋型都正常，这是怎么回事呢？前半段用的是PH4.8和少量乙腈的磷酸盐，后半段用的是PH6.8的磷酸盐和大量乙腈，系统中无气泡，平衡时间已够长。实验采用梯度洗脱。
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2012/4/5 16:19:38 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很明显，你的样品溶解性对流动相很敏感，建议走梯度的时候不要改变流动相的PH做一下对比
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有水有渝
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2012/4/5 16:21:32 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是色谱柱的柱效降低了，换一根色谱柱试试？
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2012/4/5 16:25:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xizhi(xizhi) 发表:
很明显，你的样品溶解性对流动相很敏感，建议走梯度的时候不要改变流动相的PH做一下对比


我的样品对流动相的PH很敏感。溶解性没有问题。
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2012/4/5 16:28:09 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
是不是色谱柱的柱效降低了，换一根色谱柱试试？


色谱柱是新的
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有水有渝
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2012/4/5 16:33:15 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 season2012(season2012) 发表:
原文由 xizhi(xizhi) 发表:
很明显，你的样品溶解性对流动相很敏感，建议走梯度的时候不要改变流动相的PH做一下对比


我的样品对流动相的PH很敏感。溶解性没有问题。


第一次用这个方法做这个样品，还是以前正常现在不正常了？
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season2012
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2012/4/5 17:01:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
原文由 season2012(season2012) 发表:
原文由 xizhi(xizhi) 发表:
很明显，你的样品溶解性对流动相很敏感，建议走梯度的时候不要改变流动相的PH做一下对比


我的样品对流动相的PH很敏感。溶解性没有问题。


第一次用这个方法做这个样品，还是以前正常现在不正常了？


一年前用的别的色谱柱做的没问题，现在换了根就不行了
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有水有渝
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2012/4/5 17:15:02 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那可能就是色谱柱不适合了，或者你可以打电话咨询一下现在这个色谱柱的厂商应用工程师，让他们你给重复一下你的实验，看看是不是跟你一样，如果一样，那只能换色谱柱了。
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liufeilzu
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2012/4/5 21:08:27 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得是不是应该检查一下流动相
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