主题：【讨论】保护柱对样品分离有哪些影响？

原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
保护柱对分析的影响小，有可能增加保留时间。

原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
对于大部分分析工作者来说，一只1cm长的保护柱，那么就应选择2cm或3cm长的保护柱。保护柱越长，自然所装填的色谱填料就越多，则其越能避免污染物进入分析色谱柱的机会。当然，随着保护柱的长度加长，样品的保留时间会比使用短保护柱长。一般来说，保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或相当即可。保护柱的填料装填方式也很重要。目前有薄膜装填法的保护柱，使用过程很简单方便，而且可以在实验室中进行干装。但是，其最大的缺点是不经济，特别是针对中国的具体情况，一次性使用相对费用较高。另外，薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限，只能提供有限的保护作用；不过也因为所装填的色谱料较少，保护柱的长度也较短，所以对分析样品的保留时间的影响也很小。另一种保护柱结构其实质是缩短了的色谱分析拄，设计方式上有直连式、手紧式或整体式。整体式设计是由色谱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的，必须与色谱分析柱一同订货，可以非常方便地使用，但不能够被修改。直连式结构设计可在任何时候有色谱工作者来安装连接，可以与任何品牌的色谱分析柱连接使用，而且还可以根据样品的相关情况选择不同的保护柱长度。手上紧即可。另外从保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯。可以降低保护柱的使用成本。大多数人是根据色谱分析柱的填料选择保护柱的填料，正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。但是，根据实际的分析工作，也可不必与分析色谱柱的填料完全相匹配。

原文由 Eda(diamonsil-girl) 发表:
保护柱可以延长色谱柱的寿命，会有其他影响吗？

原文由 yifan1117(yifan1117) 发表:
保护柱）不影响分离效果

  首先，配一个保护柱是个好主意。如果保护柱的式样或固定相选择错误，保护柱也能够对分离效果有很大影响。要明确的是：保护柱是保护分析柱避免强保留的组分、颗粒物和其它一些不需要的东西污染用的。保护柱比起分析柱便宜许多，所以污染的保护柱能够替换的更加勤。

理想的情况是，保护柱的固定相和分析柱恰好相同。如果固定相保留强（如高载碳量和混合相），就能够使得保留时间漂移，甚至导致不同的选择性。如果保留弱，问题就不那么明显，除非固定相影响整个体系选择性。

为了使保护柱最小化的影响分离，保护柱需要合适的装配。显然，保护柱安插在进样口和分析柱之间，但是如果管路太长（太长或者内径太大），就会造成额外的峰展宽，从而影响分离。系统引入整合保护柱（保护柱直接接在色谱柱上），从以往的报道看，基本上会达到分析柱的最佳水平。但是，整合保护柱通常和卡式色谱柱一起使用，目前已不是那么流行。不管采用什么形式的保护柱，都应当在不影响操作的前提下容易从HPLC系统中卸下和更换。

理论上，接上保护柱延长了分析柱的柱长，会增加柱效和色谱分离效果。但由于上面讨论中的一些因素的影响，增加保护柱只能维持原来的色谱分离性能在最佳水平，有时候甚至会变差。使用保护柱的好处是延长柱寿命，而非提高整体色谱分离效果。