(四) 注意事项
1. 洗涤要彻底,以免因血清中其他来源的过氧化物酶类物质所产生的非特异性反
应,而影响测定结果。
2. 实验中,应分别设置阳性、阴性、空白对照来控制实验条件,且每份样品均应做三个复管,以保证实验结果的准确性。
3. 为了克服酶标抗体因非特异性吸附而造成的较高本底,可用适量小牛血清加以抑制。
4. 当加入luminol后,迅速产生化学发光并使发光在一秒钟内达到峰值,犎;后很快衰减到基线水平。因此,只有当小试管置于仪器的测量位置时,方可加入luminol。
5. 底物的加入,是为了增强化学发光强度。但只有当底物分子与酶催化活性中心充分接触时,反应速度才能加快。当反应进行15min达到平衡时,牷/学发光强度则不再随时间的延长而变化,且在1h内保持稳定,因此,控制底物与酶反应15min后加luminol进行化学发光测定。