主题:【分享】化妆品中卵磷脂的测定方法

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化妆品中卵磷脂的测定方法



卵磷脂为黄色到棕色半透明蜡状物。具有吸湿性,在空气中色变深,能溶于醇、醚等,在任何pH下均以两性离子状态存在,所以具有表面活性作用。卵磷脂广泛用作化妆品的乳化剂及颜料的悬浮剂。
(一)钼蓝定性法
1 适用范围
本方法适用于化妆品中卵磷脂的测定。
2 原理1
卵磷脂通过层析柱与无机磷和油类杂质等分离后,将卵磷脂无机化,用钼蓝法测定其中的无机磷。
3 试剂
31 硅胶(SiO2·χH2O):100目,层析用。
32 二氨基酚溶液:称取1g24-二氨基酚(24Diaminophenol Dihydrochloride)盐酸盐及30g亚硫酸氢钠溶于水中,并稀释至100ml,过滤,保存于暗处,可使用一周。
33 83%钼酸铵溶液:称取83g钼酸铵溶于14ml水和6ml氨水的混合溶液中,并加水至100ml
34 1%氯化胆硷标准溶液:取01g氯化胆硷,加水至10ml
35 显色剂:取1ml10%氯铂酸(H2PtCl6)加25ml4KI溶液,混匀,并加水至50ml
4 仪器
层析柱:内径20mm、长110mm附有刻度的玻璃管,底部有No1半熔玻板及活栓,并联接减压瓶及减压泵。
5 分析步骤
51 样品预处理
5g样品于水浴上加热融化,加20ml氯仿+甲苯(41),加温溶解。
2g硅胶于层析管中,于硅胶上复盖少量玻璃棉,用10m1石油醚淋洗柱子。待石油醚几乎全部流出时,将上述氯仿-甲苯样品溶液乘热过柱,调节活栓及减压泵,使溶液流出量保持在46ml/min。继续以20ml20ml10ml分次淋洗柱内残存油分。
另接一减压瓶,以15ml10ml10ml10ml乙醇淋洗样品,合并淋洗液,加乙醇至50ml作为待测溶液。
52 定性测定
5ml待测溶液置于消化管中,加13个玻珠,于水浴中蒸去乙醇,残留物中加2ml过氯酸和230%过氧化氢,于火焰上小心加热,待样液几呈无色时2,可加大火力,待样品溶液冷后,加2m1二氨基酚溶液、1ml钼酸铵溶液。若有卵磷脂存在,5min后呈紫蓝色。
注解:
1)本法灵敏度高,颜色稳定,比层析法简便易于掌握,重复性好。此法是基于卵磷脂中磷的测定。每一脂性磷分子都含有一个磷酸根。卵磷脂分子中磷约占4%,如需定量时将脂性磷换算成卵磷脂的因数一般用25
2)本法所采用的高氯酸过氧化氢消化法可迅速将样品消解,使脂性磷成为正磷酸盐。若样品变为黑色或褐色,说明过氧化氢不够,可重复补加过氧化氢,直到颜色澄明为止。过剩的过氧化氢会影响下一步磷的比色测定。故此,在消解好之前应加大火力,以赶走剩余的过氧化氢。
(二)纸层析定性法
1 原理
卵磷脂通过层析柱与油分离后用盐酸水解,使其释放出胆硷,然后用纸层析法与标准胆硷比较其Rf值进行定性。
2 试剂
见(一)钼蓝定性法。
3 仪器
31 回流冷凝器及减压泵。
32 层析槽一套。
4 分析步骤
41 样品预处理
见钼蓝法。
42 定性测定
20ml待测溶液于50ml烧瓶中,加2ml盐酸,按回流冷凝器,于水浴上加温回流6小时1。在减压下将溶媒馏去仅剩2ml左右,残留液以少量乙醇转入离心管中,于水浴上蒸干,残留物用0305ml水溶解,此液用作点样用。
距滤纸底端5cm处,用铅笔划一横线,用微量注射器将05μl1%氯化胆硷标准溶液和样品溶液点样于横线上,二点相距约2cm,用乙酸+丁醇+水(154)作为展开剂,按上行法于室温展开2025cm2,取出风干,以显色液喷雾。根据标准斑点及样品斑点的蓝色位置判定是否有卵磷脂存在。
注解:
1)加盐酸并回流6小时,主要使样品水解,同时释放出胆硷。
2)展开的长度要控制,太短分离不好,太长斑点扩散,不利于观察。
该帖子作者被版主 symmacros4积分, 2经验,加分理由:谢分享。
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原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
是不是纸层析现在用的人非常少了?


纸上层析属半定量,可做限量检验
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