主题:【原创】下雨了我们还在实验室中

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everlab
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外面的雨越下越大,在实验室中还在不停的做病毒转化细胞 

实验管理概要

病毒转化细胞

实验管理原理


实验步骤

1.血液制备:柠檬酸(Citric Acide)或肝素抗凝取血1~2ml,分装入管中,每管0.5ml全血,置于4℃冰箱中30分钟。

2.EBV病毒转化:从液氮中取出冻存的0.5ml全血,在37℃水中迅速解冻。

3.将解冻细胞与10ml不含血清的RPMI 1640混合,2500 rpm离心2分钟,弃上清,用含20%的胎牛血清、青、链霉素和庆大霉素的RPMI 1640生长培养基重悬细胞。

4.加入0.3~0.5ml的EBV病毒液,37℃水浴30分钟~2小时,并不时摇动,以免出现凝块。

5.分装入50ml的培养瓶中,同时补加适量培养液,置入含5%CO2温箱中,100%温度下培养。

6.一周后加补入2ml培养基。

7.经常镜检培养物,每3~4天加液或换液,随细胞数量增多,可分装入大瓶中培养。

实验方法:www.everlab.net
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everlab
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