主题:【求助】大家帮我看看这个鬼峰出现是什么原因吧

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朙朙
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原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:
原文由 朙朙(xppcomeon) 发表:
我用乙腈和缓冲盐跑梯度跑的,这个鬼峰一直在12多分钟出现,我跑了空流动相,也是有这个峰,所以一直以为这鬼峰是缓冲盐梯度造成,在积分时,我都是选择这个保留时间不积分,以前都是这样做的,这个鬼峰吸收也就在40-50mAU左右,我的主峰都在2000-3000,以前都是这样做的。。
可最近,在一次偶然实验中我流动相缓冲盐瓶子装成水了,所以在跑空流动相时,我发现也存在这个峰,这说明这个鬼峰不是缓冲盐造成的,我怀疑我用的水有问题,可我换了好几种水还是这样,有的水直接跑流动相这个峰的峰高竟达到700mAU,严重的是今天发现在跑样品时这个鬼峰竟然达到了500mAU(我的主峰只有1800左右),而且在跑空流动相时这个峰的峰高是80mAU左右。。
现在实在不知道问题出在哪儿,是不是我这个色谱方法不好啊。。。这个鬼峰是怎么形成的。。怎么解决啊。。
这个是今天空流动相的色谱图。。大家帮我看看吧,谢谢

这样的情况,造成这种情况的原因可能有两种:1.水里面有带入的杂质,因为你的整个过程都有水的参与,而且在水的比例比较小的时候响应会小些;2.可能是样品中带入的杂质,在色谱柱中形成了残留,你现在使用的流动相不能完全把它洗脱,形成了富集,因为在走空流动相时是80的 响应,而走样品时是500的响应,说明样品中确实有。
我觉得后者的可能性较大些,你可以考虑换上一根色谱柱试试,看下情况,也坐下排除
谢谢了,我先去订购一些高纯水试试,看看结果怎样
houjjun
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先用纯乙腈冲洗一下色谱柱和检测器,再用乙腈清洗一下进样阀,多冲洗冲洗。然后再重新测。这种情况没多少办法,只能是一步一步检查。
houjjun
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下面再试是水还是缓冲盐还是样品中有杂质,一步一步排查。
jgslhq
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1.压力在2min内减低了20bar左右,这段时间内应该有较大比例流动相切换,使用较为平缓的梯度空走,看峰形是否变小。
2.楼主的峰一直存在,且有变化,使用相同的流动相和方法,更换一根色谱柱,走空针,看是否出现,已排除色谱柱的问题。
3.若确定是仪器问题,请清洗针、针座及转子密封圈等比较容易残留的组件。再进行测试。
4.更换全新的流动相,其中的水可以去超市购买哇哈哈的纯净水或其他的蒸馏水,更换新的有机相。
liufeilzu
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1检查一下不断走空白,鬼峰是不是有减小的趋势,那就用这个梯度清洗柱子;
2重新连接色谱柱,避免增大死体积
371147760
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是不是因为你的流动相的原因啊
无论是水还是ACN都要考虑一下,比如分析纯换成色谱纯
nkmaxx
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应该是仪器整个系统脏了,用异丙醇彻底清洗,小部件一件一件拆下来清洗
张驰有度
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俺也一直被这个问题困扰,一直也没找到原因,期待下。
zhmle
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150
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原文由 liufeilzu(liufeilzu) 发表:
1检查一下不断走空白,鬼峰是不是有减小的趋势,那就用这个梯度清洗柱子;
2重新连接色谱柱,避免增大死体积

这个方法可以一试
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