原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:谢谢了,我先去订购一些高纯水试试,看看结果怎样原文由 朙朙(xppcomeon) 发表:
我用乙腈和缓冲盐跑梯度跑的,这个鬼峰一直在12多分钟出现,我跑了空流动相,也是有这个峰,所以一直以为这鬼峰是缓冲盐梯度造成,在积分时,我都是选择这个保留时间不积分,以前都是这样做的,这个鬼峰吸收也就在40-50mAU左右,我的主峰都在2000-3000,以前都是这样做的。。
可最近,在一次偶然实验中我流动相缓冲盐瓶子装成水了,所以在跑空流动相时,我发现也存在这个峰,这说明这个鬼峰不是缓冲盐造成的,我怀疑我用的水有问题,可我换了好几种水还是这样,有的水直接跑流动相这个峰的峰高竟达到700mAU,严重的是今天发现在跑样品时这个鬼峰竟然达到了500mAU(我的主峰只有1800左右),而且在跑空流动相时这个峰的峰高是80mAU左右。。
现在实在不知道问题出在哪儿,是不是我这个色谱方法不好啊。。。这个鬼峰是怎么形成的。。怎么解决啊。。
这个是今天空流动相的色谱图。。大家帮我看看吧,谢谢
这样的情况,造成这种情况的原因可能有两种:1.水里面有带入的杂质,因为你的整个过程都有水的参与,而且在水的比例比较小的时候响应会小些;2.可能是样品中带入的杂质,在色谱柱中形成了残留,你现在使用的流动相不能完全把它洗脱,形成了富集,因为在走空流动相时是80的 响应,而走样品时是500的响应,说明样品中确实有。
我觉得后者的可能性较大些,你可以考虑换上一根色谱柱试试,看下情况,也坐下排除