主题:【求助】用HPLC测定氨基酸的问题

浏览0 回复10 电梯直达
youku06404
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小弟打算用HPLC测定氨基酸,用2,4-二硝基氟苯做衍生试剂,可是处理完氨基酸标准品以后发现每个氨基酸峰都有几个杂峰,想请教一下这是什么原因呢,用2,4-二硝基氟苯做衍生试剂的作用是什么呢,是是不同氨基酸衍生产物最后的吸收波长一样么?
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老多_小多
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第一,你的氨基酸浓度是不是太大了,
2、你的柱子是不是好的
zhaohua8011
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youku06404
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原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
衍生试剂的问题?进空白看看!

进过空白了,不是空白的问题。
youku06404
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
恩,是用标准品衍生的。
每个氨基酸峰都有几个杂峰?
是用对照品衍生的吗
youku06404
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原文由 老多_小多(emoc98311
第一,你的氨基酸浓度是不是太大了,
2、你的柱子是不是好的

柱子是好的,标准品的浓度有些大,是这个的原因么?
zhyabin
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2,4-二硝基氟苯是用来衍生氨基的 ,体系是不是有其它带氨基的物质?
有水有渝
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原文由 youku06404(youku06404) 发表:
原文由 老多_小多(emoc98311
第一,你的氨基酸浓度是不是太大了,
2、你的柱子是不是好的

柱子是好的,标准品的浓度有些大,是这个的原因么?


建议查看一下文献,一般氨基检测用多少浓度,浓度过大会导致过载而使峰变形。
youku06404
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原文由 zhyabin(zhyabin) 发表:
2,4-二硝基氟苯是用来衍生氨基的 ,体系是不是有其它带氨基的物质?

有的标品是含有其他氨基的,要是衍生的时候应该都衍生了吧,这个影响大么?
abian2503
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氨基酸衍生后检测,有局限

未衍生氨基酸可直接用ELSD进行检测
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