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主题：【求助】Polar-RP色谱柱压力严重异常，求助！！！

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fengmo4668

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发表于：2012/08/24 11:19:28 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这两天用Polar-RP的色谱柱，压力严重异常，怎么回事？

具体表现是：
以前正常做样是的压力，2ml/min的流速，压力107bar左右；
现在，1ml/min的流速，压力为219bar！！

可能是什么问题呢？

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2012/8/24 14:22:54 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

能提供以下色谱条件吗？
我感觉色谱柱床坍塌了，请节哀顺变！

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fengmo4668

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2012/8/24 14:48:45 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

甲醇-乙腈（90:10）.
不要吓我！

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雪妖

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2012/8/24 15:23:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该是堵了，柱子平时有反冲吗？有反冲的话，用乙腈0.2ml/min的流速反冲一晚上
如果做过蛋白类的样品，请用乙腈-水-三氟乙酸=50-50-0.1 0.2ml/min的流速反冲一晚上
如果柱子平时一直没有反冲的话，反冲的时候流速要更低

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fengmo4668

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2012/8/24 16:17:34 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 雪妖(czj_1027) 发表:
应该是堵了，柱子平时有反冲吗？有反冲的话，用乙腈0.2ml/min的流速反冲一晚上
如果做过蛋白类的样品，请用乙腈-水-三氟乙酸=50-50-0.1 0.2ml/min的流速反冲一晚上
如果柱子平时一直没有反冲的话，反冲的时候流速要更低

有反冲过。
曾经用异丙醇0.2的流速冲过一晚上，第二天还是不行，又冲了一个晚上，压力较以前几乎没有变化。（都是反冲）

因为在之前做过一次带有盐的流动相，当时是用10%的甲醇溶液0.3的流速过夜的。
所以就怀疑可能是盐没有洗干净，于是用10%的甲醇水0.3的流速又过了一次液，再次看压力仍然很高。现在1ml/min的流速压力为170bar。
与正常状态时仍然相差很大呀！

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2012/8/24 16:22:27 Last edit by fengmo4668