原文由 小不董(doxw0323) 发表:
使用水相的GPC是一定要加缓冲盐,因为样品在水相中,很可能受到离子干扰,和柱子中的填料之间也容易有化学键的作用,而我们GPC是需要将这些化学键去除,只保留体积排阻效应,这样才能达到GPC的效果, 正确得到分子量分布的结果。
你可以参考下大连依力特的sephadex-G10葡聚糖凝胶柱的说明书和他的经典应用介绍,他是使用什么缓冲盐及其浓度,再根据你样品,选择合适盐来消除离子效应。还就是看样品是否具有酸碱性,是否需要调节pH。
原文由 lindaraul(lindaraul) 发表:原文由 小不董(doxw0323) 发表:
使用水相的GPC是一定要加缓冲盐,因为样品在水相中,很可能受到离子干扰,和柱子中的填料之间也容易有化学键的作用,而我们GPC是需要将这些化学键去除,只保留体积排阻效应,这样才能达到GPC的效果, 正确得到分子量分布的结果。
你可以参考下大连依力特的sephadex-G10葡聚糖凝胶柱的说明书和他的经典应用介绍,他是使用什么缓冲盐及其浓度,再根据你样品,选择合适盐来消除离子效应。还就是看样品是否具有酸碱性,是否需要调节pH。
谢谢您的解答,我现在是做的青霉素类高分子聚合物的检查,药典方法里面就是规定了用纯水做流动相测定对照品溶液,所以现在没办法往里面加缓冲盐。已经按照说明书的介绍,用0.2M NaOH&0.2M NaCl活化了色谱柱,用水做流动相的时候,峰形还是不好。不知道是不是我在哪个细节部分没有处理好。
原文由 小不董(doxw0323) 发表:原文由 lindaraul(lindaraul) 发表:原文由 小不董(doxw0323) 发表:
使用水相的GPC是一定要加缓冲盐,因为样品在水相中,很可能受到离子干扰,和柱子中的填料之间也容易有化学键的作用,而我们GPC是需要将这些化学键去除,只保留体积排阻效应,这样才能达到GPC的效果, 正确得到分子量分布的结果。
你可以参考下大连依力特的sephadex-G10葡聚糖凝胶柱的说明书和他的经典应用介绍,他是使用什么缓冲盐及其浓度,再根据你样品,选择合适盐来消除离子效应。还就是看样品是否具有酸碱性,是否需要调节pH。
谢谢您的解答,我现在是做的青霉素类高分子聚合物的检查,药典方法里面就是规定了用纯水做流动相测定对照品溶液,所以现在没办法往里面加缓冲盐。已经按照说明书的介绍,用0.2M NaOH&0.2M NaCl活化了色谱柱,用水做流动相的时候,峰形还是不好。不知道是不是我在哪个细节部分没有处理好。
为啥用0.2M NaOH&0.2M NaCl活化了色谱柱?很高的浓度哟,pH也很大,他的说明书是这样写的?耐的pH值那么高?用NaCl对不锈钢管路也不好呀。