主题:【原创】【全民抗日,国货当自强】月旭SEC柱有奖竞答第九题

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dahua1981
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胰岛素的分析

色谱柱:    Zenix SEC-150,3mm, 7.8x300mm
流动相:    0.1%精氨酸: 乙腈: 冰乙酸=65:20:15
流速:      0.5mL/min   
温度:      室温
检测:      276nm
进样量:    100 µL
样品:      胰岛素
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2012/9/28 9:06:48 Last edit by dahua1981
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Zenix-C系列是在Zenix系列的基础上,专门推出用于高疏水性蛋白及聚合物改性蛋白样品的新型色谱柱。该键合固定相采用3m高纯硅胶作为基质,通过专利的表面修饰技术,在硅胶表面键合一层均匀的纳米厚度中性亲水涂层而制备得到。由于采用可控的化学修饰技术,确保了填料批间有着可靠的重现性。Zenix-C填料采用化学键合技术,表面亲水涂层覆盖完全,因此不仅具有优异的稳定性,而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。同时,大的孔体积保证了高的载样量及优异的分辨率。
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Zenix-C SEC蛋白分子量校正曲线

色谱柱:        7.8x300 mm, 3µm
流动相:        150 mM phosphate buffer, pH 7.0
流速:                1.0 mL/min
检测波长:        UV 214 nm
进样量:        10 µL
样品:                1. Thyroglobulin, 670 kD; 2. -Globulin, 158 kD; 3. BSA, 66 kD; 4. Ovalbumin, 44 kD; 5. Myoglobin, 17.6 kD; 6. Ribonuclease A, 13.7 kD; 7. B12, 1.35 kD; 8. Uracil, 120
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2012/9/28 9:08:32 Last edit by dahua1981
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Zenix-C 300色谱柱分离混合蛋白图谱

色谱柱:    Zenix-C 300 (7.8x300 mm, 3 µm)
流动相:        150 mM Sodium Phosphate, pH 7
流速:                1.0 mL/min               
温度:                Ambient (~23° C)
检测波长:        UV 214nm
进样量:        10 µL
样品:                1) Thyroglobulin, 670kD; 2) -Globulin, 158 kD;
3) Ovalbumin, 44kD; 4) Myoglobin, 17.6 kD;
5) Poly-DL-alanine (1-5 kD); 6) B12, 1.35KD.
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2012/9/28 9:09:27 Last edit by dahua1981
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Zenix-C 300柱分离单克隆抗体

色谱柱:        Zenix-C 300(7.8x300 mm, 3 µm)
流动相:        150 mM PBS, pH 7
流速:                1.0 mL/min               
温度:            Ambient(~23° C)
检测波长:  UV 214nm
进样量:        10 µL
样品:                Monoclonal antibody (1.3 mg/mL)
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2012/9/28 9:10:10 Last edit by dahua1981
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Zenix-C SEC 300柱BSA上样量测试图谱

色谱柱:        Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相:        150 mM Sodium phosphate, pH 7.0
流速:                1.0 mL/min
进样量:        10 µL
BSA浓度:  1, 5, 10, 25 and 50 mg/mL (from low to high)
检测波长:        UV214 nm
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2012/9/28 9:10:56 Last edit by dahua1981
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SRT SEC色谱柱技术参数表



固定相


SRT SEC-100


SRT SEC-150


SRT SEC-300


SRT SEC-500


SRT SEC-1000


SRT SEC-2000


材料


表面键合亲水薄膜的硅胶


表面键合亲水薄膜的硅胶


表面键合亲水薄膜的硅胶


表面键合亲水薄膜的硅胶


表面键合亲水薄膜的硅胶


表面键合亲水薄膜的硅胶


颗粒大小


5 mm


5 mm


5 mm


5 mm


5 mm


5 mm


孔径 (Å)


~ 100


~ 150


~ 300


~ 500


~ 1,000


~ 2,000


蛋白分子量范围


100 - 100,000


500 - 150,000


5,000 – 1,250,000


15,000 - 5,000,000


50,000 - 7,500,000


> 10,000,000


水溶性聚合物

分子量范围


500-10,000


500-25,000


1,000-100,000


2,500-500,000


5,000-1,500,000


50,000->2,500,000


pH稳定性


2 – 8.5,短时间可耐受 8.5-9.5


2 – 8.5 ,短时可耐 8.5-9.5


2 – 8.5 ,短时可耐 8.5-9.5


2 – 8.5 ,短时可耐 8.5-9.5


2 – 8.5 ,短时可耐 8.5-9.5


2 – 8.5 ,短时可耐 8.5-9.5


反压 (psi for a 7.8x300 mm)


~ 700 


~ 700 


~ 700


~700


~700


~700


最大压力 (psi)


~ 4,500


~ 4,500


~ 3,500


~ 3,000


~ 3,000


~ 3,000


盐浓度范围


20 mM - 2.0 M


20 mM - 2.0 M


20 mM - 2.0 M


20 mM - 2.0 M


20 mM - 2.0 M


20 mM - 2.0 M


最高使用温度


~ 80oC


~ 80oC


~ 80oC


~ 80 oC


~ 80 oC


~ 80 oC


流动相兼容性


常规水相及有机相溶剂


常规水相及有机相溶剂


常规水相及有机相溶剂


常规水相及有机相溶剂


常规水相及有机相溶剂


常规水相及有机相溶剂
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标准蛋白测试图谱

色谱柱:  SRT SEC-100、SRT SEC-150、SRT SEC-300、SRT SEC-500和SRT SEC-1000柱( 5 µm, 4.6mm I.D.×300mm)
流动相:    150 mM磷酸盐缓冲液,pH 7.0
流速:      0.35 mL/min
检测波长:  UV 214nm
温度:室温  (~23°C)
进样体积:  3µL
样品:      1a)甲状腺球蛋白聚合体; 1) 甲状腺球蛋白 (1.0mg/mL),
670kD; 2) BSA双聚体, 132kD; 3) BSA (1.0mg/mL), 66kD;
4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7kD; 5)尿嘧啶(2.5 mg/mL), 120 D。
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2012/9/28 9:12:57 Last edit by dahua1981
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Sepax SEC色谱柱的主要特点
特性    SRT    Zenix    SRT-C    Zenix-C
粒径    5 µm    3 µm    5 µm    3 µm
孔径(Å)    100, 150, 300, 500, 1000 & 2000    100, 150, 300    150, 300 & 500    100, 150, 300
分辨率    高    最高,更短的柱子得到更快的分离    高    最高,更短的柱子得到更快的分离
效率    高    为5 um 柱的两倍    高    为5 um 柱的两倍
选择性     SRT与Zenix相同    SRT-C与Zenix-C相同
表面结构    化学键合一层“站立”的单分子层    化学键合一层“平躺”的单分子层
典型应用领域    单克隆抗体、蛋白、多肽、核酸、寡核苷酸、病毒和水溶性聚合物等    “棘手的样品”
包括胰岛素、膜蛋白等疏水性蛋白,聚合物 (如PEG、肽链等) 修饰的单克隆抗体蛋白
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Sepax SEC色谱柱的主要特点



特性

SRT

Zenix

SRT-C

Zenix-C

粒径

5 µm

3 µm

5 µm

3 µm

孔径(Å)

100, 150, 300, 500, 1000 & 2000

100, 150, 300

150, 300 & 500

100, 150, 300

分辨率

最高,更短的柱子得到更快的分离

最高,更短的柱子得到更快的分离

效率

5 um 柱的两倍

5 um 柱的两倍

选择性

SRTZenix相同

SRT-CZenix-C相同

表面结构

化学键合一层站立的单分子层

化学键合一层平躺的单分子层

典型应用领域



单克隆抗体、蛋白、多肽、核酸、寡核苷酸、病毒和水溶性聚合物等


棘手的样品

包括胰岛素、膜蛋白等疏水性蛋白,聚合物 (PEG、肽链等) 修饰的单克隆抗体蛋白
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