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主题：【第六届原创】粪大肠菌群的曲折过程

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zsj201204
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发表于：2012/10/15 13:36:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为zsj201204原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。

粪大肠菌群的曲折过程



    从开始做粪大肠菌群这个项目以来，有过不少的疑惑。这些疑惑有的是对以前知识掌握不够，有的则是自己偷懒造成的，还有就是自己的语文水平不行，对方法的理解不到位。

    第一次，按照方法要求，配制培养基，使用的电子天平，没什么话说。后来听说这个不用那么精确，就改用托盘天平称量，这时我就犯糊涂了，到底哪边放样品哪边放砝码呢？所以每次都拿电子天平再复称下，验证自己称错没，每次记得回去上网百度，每次回去又忘记了，这么简单的问题又不好意思问别人。

    第二次，配制好培养基，没有按照要求调节pH，导致试验失败。后来把书好好看了一遍，原来是用Hcl或NaOH调节pH，牢记配制培养基的主要步骤为：配制、溶化、调pH、过滤、分装、灭菌、检验等。

    第三次，前面的没有任何问题了，初发酵结束产气或者产酸（由紫变黄），开始复发酵，直接用玻璃棒蘸取EC培养液在阳性管。结果可以产气，但是操作还是错了。其实也知道这样不对，但是书和方法标准都没有加多少EC培养液，后来就上仪器论坛发帖求助，认识了苹果，不断请教，她不厌其烦的解答。幸好是女的，男的估计早烦了，呵呵。现在这个项目做的总算象样了。初发酵后用接种环蘸取5mlEC培养液到阳性管中，用酒精灯烧红后继续下一个。
                                        接种环


    上次再看方法说明，又犯迷糊了。方法上有这么一句话：接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。因为我用的仪器是隔水式恒温培养箱，我就想到底我培养好了要不要放进水浴中呢？后来上网查了资料原来还可以用水浴锅培养，就想通了。
              隔水式恒温培养箱

    自从上论坛后，掌握了很多以前不知道的东西。曾经帮领导打不确定度那本书，对粪大肠菌群有没有不确定度也有过疑惑，后来看到过类似的帖子，明白了原因。欢迎做水质生物检测的分享大家实验过程中的问题及解决方法，让新手少走弯路！
该帖子作者被版主 水源守护者加 10积分， 2经验，加分理由：鼓励原创，权限只有10分，先加了
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水源守护者
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2012/10/15 15:43:04 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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【四季风】
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2012/10/15 15:50:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我建议还是放置恒温培养箱培养，因为恒温培养箱的温度计经过校准，培养温度较为准确，如果在水浴锅培养的话，水浴锅中上下水温的温差较大。
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【四季风】
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2012/10/15 15:54:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外再补充说一句，如果在水浴锅培养，不是在无菌环境下培养，培养管暴露在空气中，不符合微生物培养要求。
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zsj201204
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2012/10/15 16:04:55 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 【四季风】(gpwrx) 发表:
另外再补充说一句，如果在水浴锅培养，不是在无菌环境下培养，培养管暴露在空气中，不符合微生物培养要求。

不是用塞子塞住的嘛
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yuduoling
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2012/10/15 16:47:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看起来是够曲折的
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zsj201204
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2012/10/15 16:48:19 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yuduoling(yuduoling) 发表:
看起来是够曲折的

呵呵，主要自己想偷懒
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【四季风】
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2012/10/15 16:56:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
塞子有气孔透气的，试管口易受到空气的污染。
该帖子作者被版主 zsj201204加 2积分， 2经验，加分理由：意见
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zsj201204
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2012/10/15 17:02:16 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 【四季风】(gpwrx) 发表:
塞子有气孔透气的，试管口易受到空气的污染。

这个原因没想到，谢谢
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尘
fjh26
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2012/10/15 19:05:08 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
单位没有懂的老师带初期的确很辛苦，俺也是这么过来的，幸好还有论坛
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翠湖园
hhx050
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2012/10/16 14:01:30 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果有试验数据会更好些
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