38. 说说关于SDS-PAGE的几个小经验
1、做好胶后,把所有的加样孔都加上样,这样可以防止边缘的样品脱尾。
2、高电压/高电流电泳时,可以把电泳槽放到4度冰箱中进行电泳,省时省力,1hr搞定。
3、胶考染时间40min,放在凝胶摇床上(没有胶床可以放到28度普通摇床上,但要控制好摇床速度)缓缓摇动,使染色均匀,同时可提高检测的灵敏度,根据我的经验可以达到银染的级别,就是脱色时间比较长,一般需要脱色2-3d,夏天的时候要勤换脱色液,防止变臭哦
39. 质粒小提如果是用作鉴定或酶切,不必进行酚仿抽提,将溶液1.2.3 离心后的清液移入一个新的1.5ml离心管中,再次离心3-5分钟,小心取出上清液后,直接沉淀,不必担心DNA切不开,我已经这样使用一年多,没出过什么问题。当然这样的质粒不很干净,但是做鉴定足够了。尤其是实验室女同胞们,可以减少酚仿的侵害,而且节省时间。