主题:求助:ELISA测AOZ,回收高达130-170%,为何?

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fengchen153
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求助:ELISA测AOZ,回收高达130-170%,为何?用不同的厂家的(进口,国产)都一样,为何?哪位能破解?谢谢了!
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kejiaren
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请问你用哪个公司的试剂盒。我用大连普瑞康的AOZ检测试剂盒。回收率也是100%以上,我问他们,说我们添加的标样是已经衍生好了的,所以少了衍生这一步,做样品的时候应该没有这么高吧!有机会多交流一下!
尐虎ル)ㄣ灬
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原文由 fengchen153 发表:
求助:ELISA测AOZ,回收高达130-170%,为何?用不同的厂家的(进口,国产)都一样,为何?哪位能破解?谢谢了!



楞以这样看.
一,高标问题,办为呋喃类回收都不是太稳定.许多厂家为了回收率而提高了高标 准浓度,你可以自己用呋喃代谢物配一个高浓度标准品,再做回收看看.

二,回收方法问题,一般呋喃类代谢物都要做衍生化,常用二硝基苯甲醛,用HCL做辅助;而提取用的最多的是乙酸乙酯,再提取的过程中水查和有机相易发生乳化现,从而使真正用到提取的乙酸乙酯的量减少,比如说你加5ML乙酸乙酯.取2.5ML时,理论上是取了二分之一,可真正的你所取的一部分中所含的呋喃类代谢物的量要大于二分之一,这样也可能会使回收率升高.

三,再你吸取有机溶剂(乙酸乙酯)时有没有对其枪头进行润洗,通常有机溶剂在吸取第二枪时要比长一枪多,第三枪又比第二枪多,但到第四第五次以后可能就行比较正常了.


(只是个人看法,只共参考)
qjyjgu
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原文由 kejiaren 发表:
请问你用哪个公司的试剂盒。我用大连普瑞康的AOZ检测试剂盒。回收率也是100%以上,我问他们,说我们添加的标样是已经衍生好了的,所以少了衍生这一步,做样品的时候应该没有这么高吧!有机会多交流一下!



衍生好的高标准做出来的回收率已经无意义,三楼的解释答对70%左右。另外还有一个就是未衍生的高标准和标准品不配套,因为现有的标准品的得来都不是100%产率的,所以基本上不能定标,做出来的回收率不正常比较正常,另外就是你的高标的来源了。高标准的溶剂对回收率也有影响。
waterdream
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