高效液相色谱常用的几种缩短分析时间的方法
随着科学技术的不断发展分析仪器及分析方法的不断优化,降低实验成本、缩短分析时间就显得非常必要。缩短分析时间好处多多。
1. 缩短分析时间能减小仪器的耗损;
2. 缩短分析时间能减小氘灯、色谱柱等耗材部件的耗损;
3. 缩短分析时间能减少流动相、清洗液等的用量,既降低成本又减小污染;
4. 缩短分析时间能有效的降低劳动力成本;
5. 缩短分析时间能降低实验室水电等费用;
6. 缩短分析时间能缩短实验室的开放时间。
总之缩短分析时间对实验室的益处很多,能降低损耗,降低实验成本,减小实验带来的污染。不管是在人力物力上都有很多好处。
下面就介绍下高效液相色谱常用的几种缩短分析时间的方法:
1. 适当加大流速(流速在允许范围内);
2. 对于某些对温度敏感的物质,在允许范围内适当升高温度(一般情况下在等度洗脱条件下比在梯度洗脱条件下效果更明显些);
3. 流动相是有机相(包括甲醇、乙腈等)和水或缓冲盐的混合溶液时,适当增加有机相的比列;
4. 换用短甚至是细的色谱柱;
5. 选择更高效的色谱柱;
6. 采用梯度洗脱方式;
7. 减小从进样阀出口到检测池入口连接管路的长度及死体积;
8. 在离子对色谱法中就得适当增加流动相中离子对试剂的浓度;
9. 适当调节流动相的PH值。
以上这些方法都是高效液相色谱常用的缩短分析时间的方法,但有些方法对所有分析物是通用的,效果很好,有些方法就只能针对某些分析物有较好的效果,有局限性,如第2种。色谱柱也只能选择市场上有的,长度也是固定的,如我们常使用Venusil系列的色谱柱一般就是150mm或250mm的。
以上这些方法除了第7种连接管路越短死体积越小越好外,其它的都是有要求的,如有些实验方法是不能随意改变条件的。有些实验改变了一个或几个条件后可能会导致其它的不理想效果,如改变了方法第1、2、3、4、8、9种中的一种或几种时可能会导致多组分物质(包括干扰物)的分离度差,峰形不好等现象。
缩短高效液相色谱分析时间有很多好处,但必须得满足三个要求:
1. 在实验方法允许的范围内对方法进行微调;
2. 在仪器及配套设备允许的范围内对方法进行微调;
3. 在不影响分析结果与效果的前提下对方法进行微调。
缩短分析时间的几个有利结果:
1.节约时间;
2.节约试剂;
3.节约实验成本。
分析实验是效率与效果的结合,但首先要保证的就是结果的准确性与可靠性,其次才是对实验方法及操作步骤的优化。每个实验室,每个操作人员,每套实验仪器,每根色谱柱做出的实验结果可能都不一样,实验过程中不管是借鉴还是优化分析方法都要兼顾其它影响实验结果的因素,尽量减到最小。
以上均属个人看法,如有不当之处,欢迎各位大侠前来指正,小弟在此先行告谢!
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