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透射电镜（TEM）
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主题：【求助】关于生物样品制备，利用EM AC20染色的问题

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hellzhu
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发表于：2013/02/20 09:23:15 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大神！小弟做的透射电镜生物样品，利用leica AC20型的自动染色仪来进行染色，效果相当不理想啊。图片本底不清晰，对比不高。请大神指教·！拜谢！！
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洪星二锅头
coime
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2013/2/25 8:59:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有用过leica AC20，没有接收过生物类的样品，不知道lz的问题这几天有没有找到合适的解决方法

论坛里从事生物样品的TEM研究屈指可数，希望lz能多分享生物样品的制备和观察获得的心得和体会
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2013/3/5 15:25:31 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 洪星二锅头(coime) 发表:
没有用过leica AC20，没有接收过生物类的样品，不知道lz的问题这几天有没有找到合适的解决方法

论坛里从事生物样品的TEM研究屈指可数，希望lz能多分享生物样品的制备和观察获得的心得和体会


感谢关注，我也会尽量与大家分享工作心得
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plasmodesmal
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2013/3/19 19:09:39 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主那有EMTP吗？
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2013/3/20 16:56:25 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 plasmodesmal(plasmodesmal) 发表:
楼主那有EMTP吗？


？？请教一下EMTP是什么？
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plasmodesmal
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2013/3/21 19:47:29 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
leica EM TP

原文由 hellzhu(hellzhu) 发表:

原文由 plasmodesmal(plasmodesmal) 发表:
楼主那有EMTP吗？


？？请教一下EMTP是什么？
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2013/3/22 8:32:02 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 plasmodesmal(plasmodesmal) 发表:
leica EM TP

原文由 hellzhu(hellzhu) 发表:

原文由 plasmodesmal(plasmodesmal) 发表:
楼主那有EMTP吗？


？？请教一下EMTP是什么？


没有呢，制作的部分我们现在还是手工做的
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yy69038246
v2695776
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2013/11/14 9:33:51 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也是这个问题，染色很浅，你的问题解决了吗？
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tianyayouke
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2013/11/18 17:16:04 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超薄切片染色浅可能的原因有：
样品锇酸固定不充分；
超薄切片太薄；
染液浓度、染色时间及温度；
样品本身问题，如动物肠上皮等的染色就容易造成灰蒙蒙的，反差低，不同样品采用相同染色步骤可能会有一定差别，我没用过这种染色机器，你可以手动染色一下做个对比啊，希望能有帮助。
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edda601
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2013/12/13 9:13:02 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tianyayouke(tianyayouke) 发表:
超薄切片染色浅可能的原因有：
样品锇酸固定不充分；
超薄切片太薄；
染液浓度、染色时间及温度；

样品本身问题，如动物肠上皮等的染色就容易造成灰蒙蒙的，反差低，不同样品采用相同染色步骤可能会有一定差别，我没用过这种染色机器，你可以手动染色一下做个对比啊，希望能有帮助。


之前去别人的地方学习了下，他们戊二醛，锇酸固定的时间都比我在网上看到的protocol时间长。

他们一直做手动染色，效果还好。
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tianyayouke
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2014/3/7 10:09:29 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
EM AC20我们没用过，我也关注过但是没有米啊，有没有污染？是不是很费染液啊？
染色浅反差低还有和样品固定效果差超微结构保存不好有关，同一个样品再用手工染一次比较一下吧。
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