主题：【求助】关于CE分离的几个疑问？

原文由 nini2006(nini2006) 发表:

原文由 hxlyy(v2672048) 发表:

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1、beyond斑竹说的没错，估计是pH值的缘故。提高pH值到9.0以上看看；

2、 另外，波长要选择好，Dns-AAs的吸收波长在214 -254nm；

3、选择电动进样；

4、这些物质都是在EOF之后出峰的，耐心点等待让它走1 h看会不会出来。

5、曾见过一篇分离Dns-AAs的paper，人家用的BGE浓度很低：20 mM NH4Ac，然后pH是5.0，手性selector是Cu(II)-complex，电压才13.6 kV。

仅供参考~

另外，我的EOF值一般都是要在25min...我BGE也未添加任何有机溶剂，是溶液粘度太大的原因？

不甚感激啊

同样浓度下，磷酸盐的离子强度比NH4Ac要大，所以EOF会比NH4Ac体系的要慢。25 min，真是有点慢了。如果必须要这个浓度的话，你可以提高电压。根据我的经验，你这个浓度，电压上到25、27 kV应该都不会有问题的。另外，你一针跑了多长时间？

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1、beyond斑竹说的没错，估计是pH值的缘故。提高pH值到9.0以上看看；

2、 另外，波长要选择好，Dns-AAs的吸收波长在214 -254nm；

3、选择电动进样；

4、这些物质都是在EOF之后出峰的，耐心点等待让它走1 h看会不会出来。

5、曾见过一篇分离Dns-AAs的paper，人家用的BGE浓度很低：20 mM NH4Ac，然后pH是5.0，手性selector是Cu(II)-complex，电压才13.6 kV。

仅供参考~

另外，我的EOF值一般都是要在25min...我BGE也未添加任何有机溶剂，是溶液粘度太大的原因？

不甚感激啊

同样浓度下，磷酸盐的离子强度比NH4Ac要大，所以EOF会比NH4Ac体系的要慢。25 min，真是有点慢了。如果必须要这个浓度的话，你可以提高电压。根据我的经验，你这个浓度，电压上到25、27 kV应该都不会有问题的。另外，你一针跑了多长时间？

一般是50min，我看了下之前他们做的，如果样品有峰出来的话，一般在EOF10min后也就出来了。。。一会试试将BGE的浓度调到25mM，看看效果。。。谢谢斑竹啊

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1、beyond斑竹说的没错，估计是pH值的缘故。提高pH值到9.0以上看看；

2、 另外，波长要选择好，Dns-AAs的吸收波长在214 -254nm；

3、选择电动进样；

4、这些物质都是在EOF之后出峰的，耐心点等待让它走1 h看会不会出来。

5、曾见过一篇分离Dns-AAs的paper，人家用的BGE浓度很低：20 mM NH4Ac，然后pH是5.0，手性selector是Cu(II)-complex，电压才13.6 kV。

仅供参考~

另外，我的EOF值一般都是要在25min...我BGE也未添加任何有机溶剂，是溶液粘度太大的原因？

不甚感激啊

同样浓度下，磷酸盐的离子强度比NH4Ac要大，所以EOF会比NH4Ac体系的要慢。25 min，真是有点慢了。如果必须要这个浓度的话，你可以提高电压。根据我的经验，你这个浓度，电压上到25、27 kV应该都不会有问题的。另外，你一针跑了多长时间？

一般是50min，我看了下之前他们做的，如果样品有峰出来的话，一般在EOF10min后也就出来了。。。一会试试将BGE的浓度调到25mM，看看效果。。。谢谢斑竹啊

我曾经做过Dns-phe/trp, 在EOF 为10 min 的MECC 模式下，60 min还没出来。当然，模式不同出峰的性质肯定不同，我用的SDS把这些Dns-AAs 拖住了，所以出峰特别慢。不过你还是可以试试丢着让它自个跑个2、3小时看看，万一真的在后面出来了呢？

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1、beyond斑竹说的没错，估计是pH值的缘故。提高pH值到9.0以上看看；

2、 另外，波长要选择好，Dns-AAs的吸收波长在214 -254nm；

3、选择电动进样；

4、这些物质都是在EOF之后出峰的，耐心点等待让它走1 h看会不会出来。

5、曾见过一篇分离Dns-AAs的paper，人家用的BGE浓度很低：20 mM NH4Ac，然后pH是5.0，手性selector是Cu(II)-complex，电压才13.6 kV。

仅供参考~

另外，我的EOF值一般都是要在25min...我BGE也未添加任何有机溶剂，是溶液粘度太大的原因？

不甚感激啊

同样浓度下，磷酸盐的离子强度比NH4Ac要大，所以EOF会比NH4Ac体系的要慢。25 min，真是有点慢了。如果必须要这个浓度的话，你可以提高电压。根据我的经验，你这个浓度，电压上到25、27 kV应该都不会有问题的。另外，你一针跑了多长时间？

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1、beyond斑竹说的没错，估计是pH值的缘故。提高pH值到9.0以上看看；

2、 另外，波长要选择好，Dns-AAs的吸收波长在214 -254nm；

3、选择电动进样；

4、这些物质都是在EOF之后出峰的，耐心点等待让它走1 h看会不会出来。

5、曾见过一篇分离Dns-AAs的paper，人家用的BGE浓度很低：20 mM NH4Ac，然后pH是5.0，手性selector是Cu(II)-complex，电压才13.6 kV。

仅供参考~

不错。加油

另外，我的EOF值一般都是要在25min...我BGE也未添加任何有机溶剂，是溶液粘度太大的原因？

不甚感激啊

同样浓度下，磷酸盐的离子强度比NH4Ac要大，所以EOF会比NH4Ac体系的要慢。25 min，真是有点慢了。如果必须要这个浓度的话，你可以提高电压。根据我的经验，你这个浓度，电压上到25、27 kV应该都不会有问题的。另外，你一针跑了多长时间？

一般是50min，我看了下之前他们做的，如果样品有峰出来的话，一般在EOF10min后也就出来了。。。一会试试将BGE的浓度调到25mM，看看效果。。。谢谢斑竹啊

我曾经做过Dns-phe/trp, 在EOF 为10 min 的MECC 模式下，60 min还没出来。当然，模式不同出峰的性质肯定不同，我用的SDS把这些Dns-AAs 拖住了，所以出峰特别慢。不过你还是可以试试丢着让它自个跑个2、3小时看看，万一真的在后面出来了呢？

恩，试了一下，有些在80min左右出来了。。。考虑加大电压，看看