主题:【讨论】悬赏征集真蛋白的检测技术(已征集18种)

浏览0 回复52 电梯直达
可能感兴趣
hhciq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
柱前衍生高效液相色谱法对动物组织中胶原蛋白的测定

动物组织中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用邻苯二 甲醛( O P A) 与其中的一级氨基酸衍生,再用9 一 芴基甲氧基羰酰氯( F MO C ) 与其中的羟脯氨酸衍生,用反相高效液相色谱法测定羟脯氨酸含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量计算胶原蛋白含量。在 0 . O 1 ~ 5 0  m g· L  范围内,羟脯氨酸的峰面积和质量浓度之间的相关系数为 0 . 9 9 9  3 ,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为 0 . 3 0 %和 2 . 9 % 。该法选用 F MO C与氨基酸衍生产物的特征波长检测,能够完全屏蔽一级氨基酸衍生物的干扰,可快速 、准确、高效地测定羟脯氨酸及胶原蛋白的含量。
hhciq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
色谱-串联质谱分析

通过埘提取大鼠脑组织总蛋白不同方法的研究, 建立提取脑组织总蛋白的标准方 法。方法 在本实验中分别用总蛋白提取试剂盒和 自制裂解液提取脑组织总蛋 白, 测量蛋白浓度。用体积排阻色谱( S E C) 分离后分别进行基质辅助激光电离飞行时间质谱( MA L D I — T O F — M S ) 做蛋白全谱。结果 总蛋白提取试剂盒和自制裂解液总蛋白提取量分别为: ( 5 . 6± 0 . 2 ) mg 、 ( 6 . 7±0 . 5 ) m g , M A L D I — T O F — MS蛋白全谱的谱峰数分别为( 3 0 4. 2± 2 2 . 3 ) 和( 3 3 1 . 6± 3 0 . 5 ) 个。结论 自制裂解液与 常规的总蛋白提取试剂盒相比具有蛋白提取率高、 蛋白溶解性好等优点。 
hhciq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
楼主:
    我不要你的积分,支持你是因为你开了个好头。借这个机会,与大家交流一下蛋白质的检测方法,我也收获许多。
    一提起蛋白质的测定,大家习惯的想到K式,其实,还有许多我们食品不常见的方法应用在不同领域。
    现在的研究在交叉领域方面能出成绩,希望大家相互借鉴,共同进步。
该帖子作者被版主 yqfxy5积分, 2经验,加分理由:说得好
hhciq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
我们现在就用自动凯式、近红外漫反射光谱、杜马斯燃烧3种方法测定蛋白质,比色法比较麻烦。
sunlitong03
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 hhciq(hhciq) 发表:
楼主:
    我不要你的积分,支持你是因为你开了个好头。借这个机会,与大家交流一下蛋白质的检测方法,我也收获许多。
    一提起蛋白质的测定,大家习惯的想到K式,其实,还有许多我们食品不常见的方法应用在不同领域。
    现在的研究在交叉领域方面能出成绩,希望大家相互借鉴,共同进步。


省下了! 不过我觉的你说的特对! 支持!支持!支持!支持!支持!支持!支持!支持!支持!支持!
chr0mat1n
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
作为生物学出身的人,第一反应就是做个Western Blotting。
因为WB是检测蛋白与抗体之间的特异反应,所以不管你是三聚氰胺也好,尿素也好,甚至是皮革水解蛋白也好。统统都是不反应的。
不过看牛奶蛋白并不是单一蛋白,度娘说由酪蛋白(casein)和乳清蛋白(lactoal-bumin)两大部分组成。前者为牛奶在20℃,PH值4.6条件下沉淀下来的蛋白质,余下溶解于乳清的蛋白质均称为乳清蛋白。乳清蛋白则包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白及其他微量蛋白,如含铜、锌-超氧化物歧化酶等。
所以除非国家能够对不同属地的牛奶做大样本分析并得出标准,这方法估计没用。
还有,基本上一次实验要两天时间,而且可能会莫名的失败。可能需要上平行实验。
Jun Nan Li
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 sunlitong03(sunlitong03) 发表:
原文由 Jun Nan Li(yqfxy) 发表:
原理:食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,碱化蒸馏后使氨游离,用硼酸吸收 后,用硼酸标准溶液进行滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,得到蛋白含量。

使用仪器:FOSS 8400(相比原来的8100多了直接自动滴定的功能)



  检一个样的时长:250保持一小时,420℃保持一小时,冷却后上机检测。总计时约4.5小时。


你这还是采用的凯氏定氮法吧?
是的
Jun Nan Li
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 天天洗碗(binglang1985) 发表:
1楼仪器的这种做法还是相当不错的,自动消化,自动滴定,效率提高了很多,但原理应该就是凯氏定氮吧
是滴
Jun Nan Li
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 sunlitong03(sunlitong03) 发表:
原文由 Jun Nan Li(yqfxy) 发表:
原理:食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,碱化蒸馏后使氨游离,用硼酸吸收 后,用硼酸标准溶液进行滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,得到蛋白含量。

使用仪器:FOSS 8400(相比原来的8100多了直接自动滴定的功能)



  检一个样的时长:250保持一小时,420℃保持一小时,冷却后上机检测。总计时约4.5小时。


你这还是采用的凯氏定氮法吧?
是滴
hhciq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 chr0mat1n(chr0mat1n) 发表:
作为生物学出身的人,第一反应就是做个Western Blotting。
因为WB是检测蛋白与抗体之间的特异反应,所以不管你是三聚氰胺也好,尿素也好,甚至是皮革水解蛋白也好。统统都是不反应的。
不过看牛奶蛋白并不是单一蛋白,度娘说由酪蛋白(casein)和乳清蛋白(lactoal-bumin)两大部分组成。前者为牛奶在20℃,PH值4.6条件下沉淀下来的蛋白质,余下溶解于乳清的蛋白质均称为乳清蛋白。乳清蛋白则包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白及其他微量蛋白,如含铜、锌-超氧化物歧化酶等。
所以除非国家能够对不同属地的牛奶做大样本分析并得出标准,这方法估计没用。
还有,基本上一次实验要两天时间,而且可能会莫名的失败。可能需要上平行实验。


特异性强,对于营养学来说,太受限制。
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴