主题:【求助】液相色谱两针峰面积重现性差

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youlemei
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色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。
推荐答案:三人行回复于2013/08/02
用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?
补充答案:

doczheng回复于2013/08/02

这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,

zhoujin83回复于2013/08/02



你的仪器是什么型号的啊,会不会是泵的隔膜破了,因为你用了缓冲盐。还有,你说用水:乙腈=1:9的溶液冲洗,是写反了吧

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水/乙腈 70/30前面是10.2,后面是6.6这个差得有点大,是不是没有平衡好,建议把系统和色谱柱清洗一下再检测,同时观察压力的变化
三人行
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用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?
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原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?


用过之后用9/1 水/乙腈冲一个小时,又用乙腈冲洗,应该没事呀
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2013/8/3 20:30:07 Last edit by jncxyy2012
doczheng
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这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,
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这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,


要是漏液能看出来吗,我也检查了,没有漏液,就是之前还好好的,突然就不行了。
doczheng
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原文由 doczheng(doczheng) 发表:
这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,


要是漏液能看出来吗,我也检查了,没有漏液,就是之前还好好的,突然就不行了。


换了一根柱子也不行吗,试试用异丙醇冲洗一下系统的
zhoujin83
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原文由 youlemei(youlemei) 发表:
色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。


你的仪器是什么型号的啊,会不会是泵的隔膜破了,因为你用了缓冲盐。还有,你说用水:乙腈=1:9的溶液冲洗,是写反了吧
youlemei
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谢谢大家关心,找到原因了,是漏液了,但是不明显。
安平
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武灵
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原文由 youlemei(youlemei) 发表:
谢谢大家关心,找到原因了,是漏液了,但是不明显。
是之前的漏液还是之后的漏液?
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