色谱柱的再生
色谱柱在使用一段时间后柱效会下降,这时可以考虑对色谱柱进行再生。进行色谱柱再生时,应使用一个廉价的泵,我们建议最好不使用您的高效
液相色谱仪上的泵。
建议用来冲洗的溶剂体积
色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积
125-4 1.6ml 30ml
250-4 3.2ml 60ml
250-10 20ml 400ml
再生处理包括活化(右→左) 和净化(左→右) 两种。
请根据下表选择您的再生方法:
极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:
正庚烷←→氯仿←→乙酸乙酯←→丙酮←→乙醇←→水**
非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:
水←→乙腈←→氯仿(或异丙醇)←→乙腈←→水
0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱
注意:
*在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。
**如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。