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液相色谱（LC）
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主题：求助，液相色谱一个峰走成两个峰了

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lelesunshine
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发表于：2014/03/07 12:06:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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用液相色谱检测人血白蛋白中多聚体含量时，乙酰色氨酸的峰走成了两个峰，试验用的是凝胶柱，用的PH7.0的磷酸盐缓冲液，请老师们指教下，这是怎么回事，柱子是新的，才用几天，之前都是正常的，昨天用纯水冲洗柱子两个小时！今天进同样的样品，走出来的峰是一样的

下图，一个是正常的，一个是走成两个峰的，请老师们指教
推荐答案：zcc10000回复于2014/03/07
您可以查一下：1、进样时进样针是否混进气泡
              2、样品是否有污染（可以换个标准品进样看看）
              3、色谱柱质量是否存在问题
从色谱图来看，分叉的峰前面的基线也相比你之前的差，样品被污染的可能性较大。
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2014/3/7 12:43:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没用过你的条件做氨基酸，但看你的图。如果是色谱分离问题的话前面的峰也会分叉，只有一个分叉的话应该还是组分的问题。希望有人能帮着解答一下。
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2014/3/7 13:04:14 Last edit by zhx_fs_ln
zcc10000
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2014/3/7 14:23:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您可以查一下：1、进样时进样针是否混进气泡
              2、样品是否有污染（可以换个标准品进样看看）
              3、色谱柱质量是否存在问题
从色谱图来看，分叉的峰前面的基线也相比你之前的差，样品被污染的可能性较大。
该帖子作者被版主 zhaohua8011加 2积分， 2经验，加分理由：应助
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zhaohua8011
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2014/3/7 16:26:34 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱不会这么脆弱，样品问题大，再处理一份看看！
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小帅at仪器
v2856959
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2014/3/8 9:27:53 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同样条件下，再进一针，如果还是两个峰，那就是样品的问题了
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三人行
jncxyy2012
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2014/3/8 18:37:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新配制样品液进样看看情况。
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Eason
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2014/3/10 10:46:36 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
2楼说的很对，估计是样品出了原因
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doczheng
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2014/3/10 17:11:40 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品脏了可以重配，柱子脏了还得冲洗，麻烦
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lelesunshine
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2014/3/10 20:34:52 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
太感谢大家了，确认了，是样品问题~
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爱杰杰
zhchen1130
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2014/3/19 14:42:49 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种问题无非就是柱子问题、样品问题、样品残留
1、柱子如果有问题的话，基线可能不会这么平，第一针的保留时间也可能不会跟之前的那么接近，而且第一个峰还是挺不错的，应该可以排除色谱柱的原因。
2、样品残留，也就是说那个分叉峰可能是上一针的残留，但是这种情况下，一般峰宽都很宽，所以基本可以排除进样残留的原因。
所以，是你自己样品的原因。
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