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主题：【原创】液相色谱柱在使用过程中需注意的问题【xuchen666,jncxyy2012推荐】

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三人行
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发表于：2014/03/10 10:54:35 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被vickey82设置为精华；
色谱柱是液相分离系统的核心部件，正确使用和保养可以大大延长色谱柱的使用寿命。

一、色谱柱要轻拿轻放，避免强烈的碰撞和震动。



二、新购买的色谱柱用前一定要充分活化，活化方法可以参照色谱柱说明书。

A．在反相条件下活化 
要活化这类柱子，首先要使用乙腈或者甲醇淋洗，然后你选用的洗脱液进行平衡。
如果流动相中使用了缓冲液或离子对试剂，建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。缓冲冲洗应当首先以低流速进行，最后再使用正常流速。 


B．在正相条件下活化 

柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。柱子的干燥（激活）或润湿（失活）可能是需要的。使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。 


C．对于极性键合柱的特殊说明 

由于这些柱子可以用于反相或者正相条件，在进行活化以前，一定要首先检查你要使用的淋洗溶剂或洗脱液是否可以与封装在柱子里的溶剂相混溶。如果这些溶剂不能混溶，必须先使用一个合适的缓冲溶剂进行冲洗。



三、使用有缓冲盐的流动相一定要用含大比例水的洗脱液过度，用后及时冲洗。


四、流动相中缓冲盐的pH值不要太接近色谱柱的极限，还有磷酸盐缓冲盐渗透力强，有加快硅胶溶解的副作用，它的存在会降低pH使用范围。

五、样品要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。流动相中所使用的各种有机溶剂要使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或双蒸水。将所配得流动相要经过0.45μm的滤膜过滤，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

六、 短期保存用所用的流动相（不含缓冲盐）保存为佳，以尽量减少下次使用的平衡时间。一般只建议在长期保存反相柱的时候用纯甲醇或乙腈，一方面纯有机相保存有最大限度减少键合相水解的作用，但纯甲醇（乙腈）又会将已水解而暂时吸附在柱内的键合相洗脱出去，使固定相流失进程加快，寿命缩短。纯有机相保存还有易挥发使柱床变干的缺点，使用80%左右有机相保存也属好的选择，且足以避免长菌。

先总结这些，请大家来补充。
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2014/3/10 11:20:43 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相和样品液用前一定要过滤。
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houjjun
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2014/3/10 12:33:20 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
写的很好，就是字少了点，可以在适当补充点
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三人行
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2014/3/10 12:49:20 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:

写的很好，就是字少了点，可以在适当补充点


言简意赅。
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dahua1981
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2014/3/10 14:10:12 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:

写的很好，就是字少了点，可以在适当补充点


言简意赅。
一字值千金啊
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houjjun
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2014/3/10 18:49:39 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:

写的很好，就是字少了点，可以在适当补充点


言简意赅。
说是这样，但注意字数要求，有的人可能会计较
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三人行
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2014/3/10 19:52:27 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:

写的很好，就是字少了点，可以在适当补充点


言简意赅。
说是这样，但注意字数要求，有的人可能会计较


谢谢！已经补充。
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Insm_7784893b
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2022/3/31 14:38:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:流动相和样品液用前一定要过滤。
适合于所测样品的方法，活化色谱柱
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