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主题：【求助】无峰出现，什么原因？

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LY130916
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发表于：2014/04/03 14:10:15 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
测羊奶中蛋白含量，未涂层毛细管，样品缓冲溶液ph9.0，电泳缓冲溶液ph3.0，电压，电流值都显示正常，为什么没有样品峰啊，难道样品处理后，蛋白变性？还是管壁吸附严重？？？
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2014/4/3 14:33:13 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的正电压还是负电压呢？

个人感觉你的样品溶液pH与缓冲溶液pH差距有点大，不排除你的蛋白遇到缓冲溶液后被电中性并且吸附的可能。把缓冲溶液也换成pH9的试一试吧
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LY130916
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2014/4/3 14:59:03 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正电压，但是我看好多参考文献，样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的，不知什么原因，新手上路，问题较多啊
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2014/4/3 20:56:58 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 LY130916(v2850442) 发表:

正电压，但是我看好多参考文献，样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的，不知什么原因，新手上路，问题较多啊


样品不出峰考虑：

1.样品溶解问题

2.检测波长问题

3.电泳电压方向问题

4.进样是否成功

即使有吸附问题，也不应该没有信号，建议先用别的样品跑一下能不能正常出峰，确认一下是不是样品的问题，如果仪器管子溶液没有问题，参考以上几条排除一下。
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beyond1977
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2014/4/9 16:27:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好多提供点信息，谱图和电流图上来看看
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nini2006
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2014/4/9 17:05:34 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 LY130916(v2850442) 发表:
正电压，但是我看好多参考文献，样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的，不知什么原因，新手上路，问题较多啊
运行缓冲溶液通常比较极端——要么很低要么很高，目的是为了抑制电渗流，避免毛细管内壁对蛋白质的吸附。
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nini2006
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2014/4/9 17:07:54 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 LY130916(v2850442) 发表:

正电压，但是我看好多参考文献，样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的，不知什么原因，新手上路，问题较多啊


样品不出峰考虑：

1.样品溶解问题

2.检测波长问题

3.电泳电压方向问题

4.进样是否成功

即使有吸附问题，也不应该没有信号，建议先用别的样品跑一下能不能正常出峰，确认一下是不是样品的问题，如果仪器管子溶液没有问题，参考以上几条排除一下。
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ericwong
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2014/4/10 8:46:34 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
未涂层毛细管做蛋白，有些危险哦。
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