主题:【求助】无峰出现,什么原因?

浏览0 回复7 电梯直达
LY130916
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测羊奶中蛋白含量,未涂层毛细管,样品缓冲溶液ph9.0,电泳缓冲溶液ph3.0,电压,电流值都显示正常,为什么没有样品峰啊,难道样品处理后,蛋白变性?还是管壁吸附严重???
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用的正电压还是负电压呢?

个人感觉你的样品溶液pH与缓冲溶液pH差距有点大,不排除你的蛋白遇到缓冲溶液后被电中性并且吸附的可能。把缓冲溶液也换成pH9的试一试吧
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LY130916
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正电压,但是我看好多参考文献,样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的,不知什么原因,新手上路,问题较多啊
wy20071722
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原文由 LY130916(v2850442) 发表:

正电压,但是我看好多参考文献,样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的,不知什么原因,新手上路,问题较多啊


样品不出峰考虑:

1.样品溶解问题

2.检测波长问题

3.电泳电压方向问题

4.进样是否成功

即使有吸附问题,也不应该没有信号,建议先用别的样品跑一下能不能正常出峰,确认一下是不是样品的问题,如果仪器管子溶液没有问题,参考以上几条排除一下。
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beyond1977
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nini2006
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正电压,但是我看好多参考文献,样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的,不知什么原因,新手上路,问题较多啊
运行缓冲溶液通常比较极端——要么很低要么很高,目的是为了抑制电渗流,避免毛细管内壁对蛋白质的吸附。
nini2006
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正电压,但是我看好多参考文献,样品缓冲液和运行缓冲液ph值差别都是比较大的,不知什么原因,新手上路,问题较多啊


样品不出峰考虑:

1.样品溶解问题

2.检测波长问题

3.电泳电压方向问题

4.进样是否成功

即使有吸附问题,也不应该没有信号,建议先用别的样品跑一下能不能正常出峰,确认一下是不是样品的问题,如果仪器管子溶液没有问题,参考以上几条排除一下。
完全赞同!
ericwong
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