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主题：【求助】做土壤微生物的PLFA测定时，内标问题？（急）

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木偶戏
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发表于：2014/04/26 14:49:25 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做土壤微生物的PLFA测定时，内标用十九烷酸甲酯。我买了固体，请问用什么试剂把它配成溶液。？（浓度为1mg/mL溶液）
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2014/4/26 14:57:22 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问样品处理后溶剂是什么？十九烷酸甲酯在许多有机溶剂里面都可以溶解，最好和样品的溶剂一致或接近。
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木偶戏
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2014/4/26 15:13:40 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我的PLFA提取、甲酯化、测定与分析步骤

PLFA提取具体步骤如下：
①    将采回的新鲜土壤4g加入到含20ml 0.2mol/L的KOH甲醇溶液的50ml离心管中，振荡混合均匀。
②    将其在37℃温育1h（脂肪酸释放，并甲酯化，样品10min振荡一次）
③    在其加入3ml 1.0mol/L醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。
④    再加入10ml正己烷。使PLFA转到有机相
⑤    再将其600~1000 r/min离心15分钟后，将上层正己烷转到干净试管中，N2气流下挥发掉溶剂。
⑥    再将PLFA溶解在1ml体积比为1:1的正己烷：甲基丁基醚溶液中，充分溶解3~5分钟，—20℃保存，作GC-MS分析。

这样的话，我的溶剂是什么呢
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木偶戏
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2014/4/26 16:23:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
请问样品处理后溶剂是什么？十九烷酸甲酯在许多有机溶剂里面都可以溶解，最好和样品的溶剂一致或接近。


我的PLFA提取、甲酯化、测定与分析步骤

PLFA提取具体步骤如下：
①        将采回的新鲜土壤4g加入到含20ml 0.2mol/L的KOH甲醇溶液的50ml离心管中，振荡混合均匀。
②        将其在37℃温育1h（脂肪酸释放，并甲酯化，样品10min振荡一次）
③        在其加入3ml 1.0mol/L醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。
④        再加入10ml正己烷。使PLFA转到有机相
⑤        再将其600~1000 r/min离心15分钟后，将上层正己烷转到干净试管中，N2气流下挥发掉溶剂。
⑥        再将PLFA溶解在1ml体积比为1:1的正己烷：甲基丁基醚溶液中，充分溶解3~5分钟，—20℃保存，作GC-MS分析。

这样的话，我的溶剂是什么呢?
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symmacros
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2014/4/26 18:14:28 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以考虑用甲基丁基醚溶解十九烷酸甲酯（先少量试一下溶解性，应该无什么问题，但不知道有无其它要求）。
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千层峰
jxyan
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2014/4/28 13:48:03 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 木偶戏(v2873214) 发表:
我的PLFA提取、甲酯化、测定与分析步骤

PLFA提取具体步骤如下：
①        将采回的新鲜土壤4g加入到含20ml 0.2mol/L的KOH甲醇溶液的50ml离心管中，振荡混合均匀。
②        将其在37℃温育1h（脂肪酸释放，并甲酯化，样品10min振荡一次）
③        在其加入3ml 1.0mol/L醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。
④        再加入10ml正己烷。使PLFA转到有机相
⑤        再将其600~1000 r/min离心15分钟后，将上层正己烷转到干净试管中，N2气流下挥发掉溶剂。
⑥        再将PLFA溶解在1ml体积比为1:1的正己烷：甲基丁基醚溶液中，充分溶解3~5分钟，—20℃保存，作GC-MS分析。

这样的话，我的溶剂是什么呢


你这样处理后，上机样品的溶剂是1:1的正己烷：甲基丁基醚，

可以用1:1的正己烷：甲基丁基醚配制内标溶液。
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