高效色谱柱致液相色谱更高效
大家都知道高压恒流输液泵、灵敏稳定检测器、高效液相色谱柱是高效液相色谱的三大核心部件,其中高效液相色谱柱是核心中的核心。液相色谱法是一种分离、分析技术,其中分离技术是区别其它分析技术的独特技术,发展过程中被逐步借鉴并引用成为更高级的联用技术,如液质联用、气质联用、原子吸收、原子荧光与液相联用形成形态分析等。可见分离在分析界的地位,起着分离作用的色谱柱在这其中充当的角色,必然是不同凡响。
液相色谱高效一般体现在分离度好,色谱柱理论塔板高,检出限低,线性好,定性、定量精密度高、色谱峰形好,保留时间短,检测更准确等等,其中分离度好、检出限低、保留时间短更被看好。
液相色谱柱除了和检测线性关系小些,在其它高效液相色谱中它都起着非常重要的作用,直观的体现就是分离度好,检出限低,保留时间短等。
现在就以大家比较关注的防腐剂检测为主,实例介绍下。
首先看看不同色谱柱下的效果
色谱条件
检测器:紫外检测器
色谱柱:C18色谱柱
检测波长:230nm
流动相:甲醇:0.02mol/L乙酸铵=5:95(V:V)
流速:1.0ml/min
柱温:30゜C
进样量:20ul
第一根4.6mm X 250mm(5μm)色谱柱色谱图:
第二根4.6mm X 250mm(5μm)色谱柱色谱图:
第一根4.6mm X 150mm(5μm)色谱柱色谱图:
第二根4.6mm X 150mm(5μm)色谱柱色谱图:
第三根4.6mm X 150mm(5μm)色谱柱色谱图:
通过以上色谱图我们不难看出,不同的色谱柱带来的实验结果各不相同,有的相差不大,有的相差甚大。综合考虑实验结果的准确、可靠,实验过程中选择一款优秀的色谱柱显得异常必要。
当然色谱柱柱效也和色谱条件有关,比如在以上条件中增加甲醇含量、增加泵流量、升高色谱柱温度等一项或多项,其它条件不变,样品出峰时间也会缩短一些,但付出的可能是分离度较差等代价。但如果减少进样量,色谱峰宽就会变窄,分离度就会好一些,峰形也会好一些。再采用增加甲醇含量、增加泵流量、升高色谱柱温度等一项或多项,其它条件不变方式,可能会达到分离度好,检出限低,保留时间短等优良效果。这样的效果一般来说不是不会非常明显,肯定没有选一款优秀的色谱柱效果好。
色谱柱是色谱分离的主角,在洗脱、分离环节起着决定性的作用,但即使这样也一定不要忽略流动相的作用,如果没有合理、正确的流动相,再好的色谱柱也是白搭。
色谱柱虽然重要,但它绝不是万能的,不是只要有了它就什么都能解决的。它只是一个部件,只是整套色谱的一小部分,我们在使用过程中要有一个清醒的认识,一定不能盲目。
色谱柱是色谱的核心、灵魂,液相色谱柱也不例外,也理所当然的是液相色谱的核心、灵魂,在液相色谱中起着无与伦比的作用,我们一定要高度重视,合理利用。