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主题：【求助】HPLC 水溶性維生素(產品牛奶咖啡營養品)

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发表于：2014/10/02 21:02:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位前輩好 10/1長假快樂

小弟最近遇上個棘手的HPLC case,是個營養飲料,類似下圖,但是含有蛋白質 礦物質 維生素 醣類 膠質等多種成分





目的:

這個產品想要驗水溶性維生素(9種, B1 B2 C B6 B12 Biotin 菸鹼酸泛酸葉酸)以及脂溶性維生素(四種 A D E K)



標準品:

目前水溶性標準品如附檔STD的圖10ppm可以分得很清楚



檢品:

如附檔product 看起來有很多其他物質的干擾



前處理方式:

目前是用乙醇去蛋白,超音波震盪後離心取上層液用HPLC分析



HPLC方法:

Column CAPCELL PAK C18 UG120 S5 : 2.0 mm i.d.×250 mm

Mobile phase {5mmol/L Sodium hexanesulfonate, 20mmol/L H3PO4} / CH3CN = 91 / 9

Flow rate 189 μL/min

Temperature 40 ℃

Detect UV 210 nm

Inj. vol. 1.0 μL





要請教眾專家們,這樣品中含有蛋白質,礦物質,膠質,維生素,糖分等多種成分,

要分析其中”水溶性維生素”的話樣品前處理程序有沒有甚麼好建議?

有完整程序建議更好~~

先謝過大家了

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夏天的雪
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2014/10/3 7:27:32 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
前几种物质保留时间太靠前了，容易受到干扰。可以考虑延后他们的保留时间，如果保留时间靠前，就对前处理要求高了
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2014/10/3 20:04:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:

前几种物质保留时间太靠前了，容易受到干扰。可以考虑延后他们的保留时间，如果保留时间靠前，就对前处理要求高了


謝謝雪大回應

目前有考慮 把移動相的有機成分ACN 調高或調低試看看 會不會有助於前面的物質分得更開

前處理的部分 一直很困擾小弟阿
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lifesinger
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2014/10/4 11:05:43 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
照国标做啊，不行再另想办法。

你目前用的前处理步骤也太简单了吧，如果这样真可行，国标那些复杂的方法还

会出现么？

想都不用想。
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夏天的雪
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2014/10/4 17:04:46 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nn10325240(nn10325240) 发表:
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:

前几种物质保留时间太靠前了，容易受到干扰。可以考虑延后他们的保留时间，如果保留时间靠前，就对前处理要求高了


謝謝雪大回應

目前有考慮 把移動相的有機成分ACN 調高或調低試看看 會不會有助於前面的物質分得更開

前處理的部分 一直很困擾小弟阿
前处理可以参考国标方法，楼上讲的有道理，您的前处理有点简单
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有水有渝
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2014/10/6 14:26:54 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是否可以考虑固相萃取，多找找相关标准与文献参考一下。
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nn10325240
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2014/10/6 21:10:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感謝樓上幾位哥的建議.

小弟看過國標 老實說因為樣品太複雜 而且設備只有HPLC-UV
所以想看看有沒有能人異士 能夠提供不錯的方法

一種前處理就可以分析多種水溶性維生素的

幫然如果沒有的話 還是得回頭 驗一個維生素就做一種前處理



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夏天的雪
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2014/10/7 10:57:41 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如3楼所述，如果有简单的方法，就不需要那么多的方法标准了。您的样品比较复杂，估计用液相方法很难通过简单的前处理方法达到您的目的。
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zhaohua8011
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2014/10/8 9:04:51 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
此类样品就是这样，峰比较多！尤其是水溶性维生素！
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nixiaolong
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2014/10/10 8:10:36 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以使用脂肪酶，蛋白质酶，淀粉酶进行酶解离心处理
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