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影响理论塔板数的因素比较多,不同仪器的状态也是有差别的,正常状态下理论塔板数与出厂报告正负偏差20%都是可以接受的。
一般来说,影响塔板数有哪些因素啊?
理论塔板数(N)取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效时所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:理论塔板数N=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方) 柱效率用理论塔板数定量地表示:N=16*(t/w )2。其中,t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间,w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。
请问一般用什么样品和流动相来测试柱效比较好呢?
这个不同厂家色谱柱选择的样品都不尽相同,一般都是有一些组分是测死时间,一些测塔板数,一些测分离度,以安谱CNW反相色谱柱为例,使用尿嘧啶(基本大多数厂家都普遍使用)测死时间,尿嘧啶为强极性物质,在反相柱上基本不保留,测得的结果最接近理论值;用甲苯测塔板数,甲苯为弱极性物质,在色谱柱上有保留比较强 ;萘是非极性物质,保留更强,因此可以测得其与甲苯的分离度。一般流动相都是甲醇-水和乙腈-水体系。