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主题：关于液相流动相梯度

浏览0 回复9 电梯直达
梦想起航
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发表于：2014/11/03 13:35:52 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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各位前辈，请教个梯度的问题。

流动相B甲醇；A  10mmol/L的磷酸二氢甲缓冲液（用磷酸调至2）

设置梯度：0：A  80% ；B 20%

                  3：A  80%  ；B 20%

                  8：A  20%  ；B 80%

                10：A  20%  ；B 80%

                10.1：A  80%  ；B 20%

                  12：A  80%  ；B 20%

就是这么个梯度，我的疑问是：缓冲盐遇到大浓度的有机相不会在色谱柱中析出吗，这个梯度没问题吗（来源于某一检测方法）；水相带缓冲盐的与有机相混合的梯度应该怎样设置，有哪些注意事项呢？

谢谢各位大神了！
推荐答案：夏天的雪回复于2014/11/03
缓冲盐的析出需要一个过程，并不是与有机相混合就会立即析出，楼主担心有析出可以预先配制相应浓度的混合液，检查看是否会析出；使用缓冲盐需要注意，用完后及时用水和低浓度的有机相冲洗色谱柱和仪器，否则时间长了会在一些管路接头或泵的位置发现白色物质；楼主用的流动相调的pH比较低，使用时需要检查色谱柱的耐受范围，以及配置流动相时不要配错，防止损坏色谱柱
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夏天的雪
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2014/11/3 13:58:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
缓冲盐的析出需要一个过程，并不是与有机相混合就会立即析出，楼主担心有析出可以预先配制相应浓度的混合液，检查看是否会析出；使用缓冲盐需要注意，用完后及时用水和低浓度的有机相冲洗色谱柱和仪器，否则时间长了会在一些管路接头或泵的位置发现白色物质；楼主用的流动相调的pH比较低，使用时需要检查色谱柱的耐受范围，以及配置流动相时不要配错，防止损坏色谱柱
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浪淘沙隐
zhoujin83
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2014/11/3 15:49:35 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
80%乙腈20%的10mM磷酸盐我们经常用，没什么事。
使用80%乙腈20%的10mM磷酸盐预混可能会析出，但是高压下析出可能减小。
我倒是感觉梯度变化太快了。
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梦想起航
v2858693
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2014/11/3 16:24:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好的，谢谢！

您指哪一部分变化快啊，欢迎指出，这方法也在摸
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夏天的雪
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2014/11/3 20:14:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 梦想起航(v2858693) 发表:
好的，谢谢！

您指哪一部分变化快啊，欢迎指出，这方法也在摸
需要结合色谱图调节流动相
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夏天的雪
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2014/11/3 20:15:21 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
倒数第二步变化的有点快
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dywzqbx
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2014/11/13 22:20:50 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:

倒数第二步变化的有点快


这个程序10min 应该就完了，后面2min是平衡色谱柱。之前这样做，应该没什么问题吧
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夏天的雪
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2014/11/13 22:52:32 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dywzqbx(dywzqbx) 发表:
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:

倒数第二步变化的有点快


这个程序10min 应该就完了，后面2min是平衡色谱柱。之前这样做，应该没什么问题吧
3-8min基线有没有漂，如果不飘不影响检测应该没有什么问题。
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有水有渝
xky0230699
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2014/12/17 15:52:37 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
取8mLA与2mLB手动混合摇匀，在一起看看有没有析出，正常情况下应该不会析出结晶。
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linda427524
v2651542
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2014/12/24 10:58:42 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做过15%的0.01mol/l磷酸盐pH7.0-85%乙腈，没有问题 一般不会析出的盐浓度不高
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