主题：【第七届原创】【许愿原创】高效的色谱柱快速的中药检测

高效的色谱柱快速的中药检测

    今天我们介绍中药材马钱子及马钱子高效液相色谱法检测。

    马钱子为马钱科植物马钱的种子。马钱是一种常绿乔木植物，多生于山地、林中，在东南沿海各省均有人工栽培。

    马钱子药物成分主要有士的宁（strychnine，又名番木鳖碱）、马钱子碱（brucine）、番木鳖次碱（vomicine）、马钱子新碱（novacine）、番木鳖甙（loganin）等。

    马钱子性寒，微有香气，味极苦，毒性大，入药具有止痛、消肿、消炎抗菌、活血通络、除风祛湿、祛瘀生肌、抗癌等药物功效。可用于治疗风湿顽痹、麻木瘫痪、跌扑损伤、痈疽疮毒、骨折肿痛、痈疽肿痛。由于该物具有很大毒性，不宜多服久服及生用，运动员慎用，孕妇禁用，最好按医师叮嘱服用。

    下面我们就进入中药材马钱子快速检测高效液相色谱法介绍。

实验部分

检测原理

    准确称取该药材适量，溶解、水浴回流提取后有进样器进入高效液相色谱系统，经C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量（外标法）计算。

仪器及试剂

    仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱+C18色谱柱+进样器+色谱工作站），超声波清洗仪，溶剂过滤器，具塞锥形瓶，三号筛（药典筛），电子天平，水浴回流装置，滤纸过滤装置等。

    试剂：甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），氢氧化钠（分析纯），三氯甲烷（分析纯），超纯水等。

样品制备

    对照品溶液制备：精密称取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品5mg，分别置于50ml容量瓶中，加三氯甲烷10ml使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别制得0.12mg/ml士的宁、0.1mg/ml马钱子碱对照品溶液，备用。

    供试品溶液制备：取马钱子药材适量，充分粉碎后过三号筛（药典筛），精密称取过筛粉末0.6g置于具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液3ml，摇匀，静置30分钟，精密加入三氯甲烷20ml，密塞，称定重量，水浴中回流提取2小时，放冷，再次称定重量，用三氯甲烷补足减少的重量，摇匀，取适量三氯甲烷液，滤纸滤过，精密量取续滤液3ml，置于l0ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，0.45um微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器

色谱柱：Venusil XBP C18(4.6X250mm，5ul)

V9520525CK0043

流动相：乙腈：0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L的磷酸二氢钾等量混合（用10%磷酸调节pH值2.8）=21:79（V:V)

检测波长：260 nm

流速：1.0 mL/min

柱温：30℃

进样量：l0μl

对照品（士的宁含量0.12mg/ml，马钱子碱含量0.1mg/ml）色谱图：

供试品（马钱子样品）色谱图：

    经计算，本品含士的宁（C21H22N202）为0.69%，马钱子碱（C23H26N204）为0.67%。而药典要求士的宁含量应为1.20%～2.20%，马钱子碱含量不得少于0.80%，所以该药品不符合药典要求，也就是说按药典要求，该药品为不合格品。

    该方法检测马钱子中的士的宁、马钱子碱快速、方便，准确、可靠，视为好方法。该检测的成功不仅取决于方法的可靠性，选择一款优良的色谱柱也是检测成功的关键。

    该方法检测该样品已经是非常快速了，但如果您还不满足，还想再快速些，那您把流动相换为乙腈：0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L的磷酸二氢钾等量混合（用10%磷酸调节pH值2.8）=25:75，这样检测时间应该还会提前3-5min，检测会更快速。如果您还不满足，您可以继续加大流动相中乙腈含量，但一定得确保样品间分离度，否则影响检测结果的准确性，那样就得不偿失了。

    快速、准确的检测是我们所期待的，选择检测方法和优化方法一定得立足于现实情况。当然选择色谱柱非常重要，一款优秀的色谱柱，所带来的结果往往都是可喜的，都超乎于事半功倍。