土贝母高效液相色谱快速检测
土贝母属于攀援性蔓生草本植物,归为葫芦科植物假贝母的干燥块茎。生长在河南、河北、山东、山西、陕西、甘肃、云南等地的山坡或平地。
土贝母的药物功效很多,其中就有清热、消肿、散结、解毒、除风湿等功效。可用于治疗乳痈、瘰疬、乳腺炎、利痰、颈淋巴结结核、慢性淋巴结炎、肥厚性鼻炎、外科痰毒等多种病症。
其中土贝母苷甲是土贝母中重要成分之一,下面是高效液相色谱法检测土贝母中土贝母苷甲含量介绍。
检测原理
取适量干燥样品经前处理后进入高效液相色谱系统,由C18色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量(外标法)计算。
仪器及试剂
仪器:高效液相色谱仪(紫外检测器+等度泵+柱温箱+进样器:C18色谱柱),超声波清洗仪,溶剂过滤器,电子天平,恒温水域,分液漏斗,四号筛(药典筛)等。
试剂:甲醇(色谱纯),乙醇(分析纯),正丁醇(分析纯),超纯水等。
样品制备
对照品溶液制备:精密称取干燥至恒重的土贝母苷甲对照品5mg,置于50ml容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,制备成0.1mg/ml土贝母苷甲对照品溶液,备用。
供试品溶液制备:取本干燥药材适量,充分粉碎后过四号筛(药典筛),精密称取过筛粉末0.3g,置于具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,称定重量。超声处理30分钟后,再次称定重量,用70%乙醇补足减少的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤25ml,水浴蒸至基本无醇味,加水10ml并移至分液漏斗中,用水饱和正丁醇提取4次(20ml、20ml、10ml、10ml),合并正丁醇液,水域蒸干,残渣加少量甲醇溶解,转移至10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,0.45um微膜滤过,待测。
色谱条件
检测器:紫外检测器
色谱柱:C18色谱柱
检测波长:214nm
流动相:甲醇一水(65:35)
流速:1.0ml/min
柱温:30℃
进样量:10ul
对照品色谱图:
供试品色谱图:
该方法检测土贝母中土贝母苷甲,色谱峰形非常优异,分离度很好,检测结果准确、可靠,操作方便、简单,是一种好方法。实验证明该方法非常适合该药品快速检测。