主题:【第七届原创】土贝母高效液相色谱快速检测

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土贝母高效液相色谱快速检测

    土贝母属于攀援性蔓生草本植物归为葫芦科植物假贝母的干燥块茎。生长在河南、河北、山东、山西、陕西、甘肃、云南等地山坡或平地。

    土贝母的药物功效很多,其中就有清热消肿散结解毒除风湿等功效用于治疗乳痈瘰疬乳腺炎、利痰、颈淋巴结结核慢性淋巴结炎肥厚性鼻炎外科痰毒等多种病症

    其中土贝母苷甲是土贝母中重要成分之一,下面是高效液相色谱法检测土贝母中土贝母苷甲含量介绍。

检测原理

    取适量干燥样品经前处理后进入高效液相色谱系统,由C18色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量(外标法)计算。

仪器及试剂

    仪器:高效液相色谱仪(紫外检测器+等度泵+柱温箱+进样器:C18色谱柱),超声波清洗仪,溶剂过滤器,电子天平,恒温水域,分液漏斗,四号筛(药典筛)等。

    试剂:甲醇(色谱纯),乙醇(分析纯),正丁醇(分析纯),超纯水等。

样品制备

    对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的土贝母苷甲对照品5mg,置于50ml容量中,流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,制备成0.1mg/ml土贝母苷甲对照品溶液,备用。

    供试品溶液制备取本干燥药材适量,充分粉碎后过四号筛(药典筛,精密称取过筛粉末0.3g,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,称定重量超声处理30分钟,再称定重量,用70%乙醇补足减的重量,摇匀,滤过精密量取续滤25ml,水浴蒸至基本无醇味,加水10ml分液漏斗中,用水饱和正丁醇提取4次(20ml、20ml、10ml、10ml),合并正丁醇液,水域蒸干,残渣加少量甲醇溶解,转移至10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,0.45um微膜滤过,待测

色谱条件

检测器:紫外检测器

色谱柱:C18色谱柱

检测波长:214nm

流动相:甲醇一水(65:35)

流速:1.0ml/min

柱温:30℃

进样量:10ul

对照品色谱图:



供试品色谱图:



    该方法检测土贝母中土贝母苷甲,色谱峰形非常优异,分离度很好,检测结果准确、可靠,操作方便、简单,是一种好方法。实验证明该方法非常适合该药品快速检测。

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