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主题：【第七届原创】蜂蜜中维生素B2检测

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doublexue
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发表于：2014/12/29 13:32:11 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为doublexue原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
蜂蜜的化学成分丰富、复杂，除了65%-80%的糖以外，还含有多种氨基酸、维生素和酚酸黄酮等活性成分。蜂蜜的标准中并没有关于维生素检测的方法，文献资料中也未查到。

试验前处理：

称取蜂蜜样品约15克于锥形瓶中，加入30mL 0.1mol/L盐酸，充分摇匀，盖上瓶塞，直接放入高压灭菌锅内，在121℃下保持30min，冷却后取出，用乙酸钠调节pH至4.0左右，加入2mL混合酶（蛋白酶+淀粉酶+酸性磷酸酶），放置到37℃的恒温培养箱中过夜。将酶解后的样液转移到50mL容量瓶中，用纯水定容。

定容后的样液转移到离心管中，3500r/min离心8min，取上清液用0.45um滤头过滤，滤液待上机。

标准曲线：

称取一定量维生素B2的标准品，用纯水配置标准系列工作标液。

色谱条件：

液相：Waters 2695，配荧光检测器 2475




色谱柱：Waters XBridge C18柱（5um,250mm×4.6mm）

流动相：甲醇：酸水（pH=4.5）=35:65

酸水用氨水、乙酸、三乙胺调节到pH为4.5

流速：0.75ml/min (柱压高)

进样量：20uL

检测波长：激发波长462nm，发射波长522nm

维生素B2的标准曲线：标准曲线相关系数达到三个9


标准品色谱图


样品色谱图




注意事项：在整个样品前处理过程中，都需要避光操作。

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2014/12/29 15:25:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标准曲线是配制不同浓度的对照做的，还是不同进样量得到的？
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doublexue
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2014/12/29 15:40:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 逆天一棍(fengmo4668) 发表:

标准曲线是配制不同浓度的对照做的，还是不同进样量得到的？


是配置不同浓度的对照做的，进样量都是20uL
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逆天一棍
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2014/12/29 16:23:28 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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标准曲线是配制不同浓度的对照做的，还是不同进样量得到的？


是配置不同浓度的对照做的，进样量都是20uL
配制水平很过硬啊。
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韶乐penny
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2019/3/13 9:29:02 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维生素B2标准品需要校正，老师校正和不校正差的多嘛
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yy_0324
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2019/3/14 2:50:37 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
蜂蜜中检验维生素B2，验证了蜂蜜中所含丰富的维生物B2，丰富了蜂蜜的成分测定！
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