主题:【讨论】降低有机相比例,会造成出峰顺序改变吗?

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doublexue
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近日用液相测水产品中的四种嘌呤,先走的四个单标,想确定各个保留时间。开始流动相是5%的甲醇和95%的盐相,流速1ml/min。发现有两个峰分不开,于是将甲醇降低到3%,流速降到0.8,希望洗脱慢一些,可以分的好一些。确实四个峰分都分开了。但是在前一个条件下第一个出峰的物质在第二个条件下变成第三个出峰了。
我一直以为降低流速,降低有机相比例,极性增大,只是出峰变慢,洗脱慢一些。怎么连出峰顺序也改变了??
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夏天的雪
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常用改变流动相中有机相比例的方法改善分离,但是出峰顺序改变的现象不多见
doublexue
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原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:

常用改变流动相中有机相比例的方法改善分离,但是出峰顺序改变的现象不多见


是的,常用的方法,很少遇到这样峰顺序会变的,虽然不影响检测,还是比较困惑
老多_小多
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weed2008
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nixiaolong
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这个现象是有的,楼主还是比较细心的,有时候忽略这个问题容易发生误判
doublexue
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原文由 nixiaolong(nixiaolong) 发表:

这个现象是有的,楼主还是比较细心的,有时候忽略这个问题容易发生误判


是的,大意一点的话,直接用混标的就可能会出错了
浪淘沙隐
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我最近也碰到了这种情况,我也挺纳闷的,但是我想可能是某些物质对于有机相特别敏感,虽然我们只改变了一点点比例,但它们的保留发生了大的变化。
冰块
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是少见的现象,不过你的水相含有盐估计也有pH值的调整,那么在分离可离子化的样品时这种现象会比纯粹的有机相和水相的梯度多一些。
doublexue
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原文由 冰块(burningsnow) 发表:

是少见的现象,不过你的水相含有盐估计也有pH值的调整,那么在分离可离子化的样品时这种现象会比纯粹的有机相和水相的梯度多一些。


有道理啊,我现在也怀疑是pH造成的
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