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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】CE 正向反向电流不一致

浏览0 回复24 电梯直达
chenhua_zhang
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发表于：2015/05/11 05:12:03 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仪器又有问题了，觉得情况和原先的帖子有些类似
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20150304/5691690/。
用 20 mM pH 7.4 的 phosphate buffer 检查电流， 毛细管 60.2cm, 50cm effective length, 加电压 30kV,
反向的电流稳定在 32 mA; 切换到正向，电流先稳定在 32mA 然后逐渐在 10 min内 上升到 42 mA。
和直接的情况有点类似，不过上次直接换了一个Cartridge就好了，这次用的是一个月前买的新Cartridge,
难道是Cartridge保养不好么？
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2015/5/11 13:22:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
Cartridge一般不会那么快就坏的，除非你存放条件很极端：高温或者泡在有机溶剂里，不过谁会那么傻呢？呵呵~

但是不排除买到了次品，所以还是先检查一下。
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2015/5/18 8:24:31 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
电渗流发生反转了。你的PBS是商品试剂盒吗？在有效期吗？自己配置的话，化学试剂的纯度够吗？
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CEcret
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2015/5/18 21:43:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
毛细管有没有活化呢？
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ericwong
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2015/5/29 15:39:24 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主遇到的问题还继续存在吗？找到原因了吗？
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chenhua_zhang
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2015/6/12 11:48:59 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
目前问题没有解决，先放了一个月假哈，大家等久了。

最近回来测试，电极卸掉了，两边什么都不放，放上卡盒后（有毛细管）直接加电压。
正向的电压和电流1:1上升，最后current leakage;
反向的电压从一直停留在1.0 KV （设置为30KV）几分钟后 突然变成30KV。

工程师建议卡盒卸掉毛细管来测试，不过只是卸掉毛细管放在横梁上右边有漏冷冻液。

具体原因还没找到，反向的电压加不上很奇怪，电压一开始只能加到1.0 KV 左右。等有进展再来更新哈
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chenhua_zhang
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2015/6/13 10:45:53 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
电渗流发生反转了。你的PBS是商品试剂盒吗？在有效期吗？自己配置的话，化学试剂的纯度够吗？


嗯，这个溶液是自己配的，之前也用纯度够，都会用滤膜过滤后再使用的。
应该不是缓冲液的问题，最近把电极直接插入空的瓶子里也出现了一些电流和Current leakage的问题。
理论上讲断路的话，电流在0左右。
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chenhua_zhang
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2015/6/13 10:48:06 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
Cartridge一般不会那么快就坏的，除非你存放条件很极端：高温或者泡在有机溶剂里，不过谁会那么傻呢？呵呵~

但是不排除买到了次品，所以还是先检查一下。

ABSCIEX 工程师 让我把毛细管卸掉，只是放上卡盒测试电流，结果横梁右侧冷凝液漏的哗哗的。 看上去应该是密封不太好，但是卡盒里面装上毛细管后就不会有漏液的问题。
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chenhua_zhang
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2015/6/13 10:49:28 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
毛细管有没有活化呢？

1 M NaOH 30 min Nanopure Water 10 min 25psi
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nini2006
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2015/6/13 11:11:07 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 chenhua_zhang(v2636203) 发表:

ABSCIEX 工程师 让我把毛细管卸掉，只是放上卡盒测试电流，结果横梁右侧冷凝液漏的哗哗的。 看上去应该是密封不太好，但是卡盒里面装上毛细管后就不会有漏液的问题。
啊？？！！ABSCIEX 工程师根本不懂Beckman，瞎指挥啊。。。冷凝液是直接接触毛细管的，毛细管不在了的话冷凝液肯定要从毛细管入口和出口处流出来啊 o(╯□╰)o
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2015/6/13 11:14:59 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也有可能是power supply 系统出了问题，这个可不好解决
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