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主题：【已应助】液相基线问题

浏览0 回复8 电梯直达
wjyyh1983
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发表于：2015/06/03 13:54:20 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大大，你们好。请教一下，前三分钟220nm下总是出现波浪线（254nm正常，无波浪线和漂移），后面基线向下漂移，是何缘故？压力流速都正常，流动相A：水（0.1%TFA）B：乙腈（0.1%TFA），都经过超声除气泡了。梯度如下：
Time (min)        A        B
  0.5                95        5
  7.0                5        95
  7.1                2        98
  9.1                2        98
  9.2                95        5
  11                stop
仪器是Agilent 1100的。谢谢各位！
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2015/6/3 14:09:21 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
水换成屈臣氏的水试下。
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励
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夏天的雪
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2015/6/3 15:28:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
波浪线可能是TFA影响的，基线有漂移应该是梯度导致，您这95-5%的变化幅度有点大
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浪淘沙隐
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2015/6/4 8:32:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度太急了，1100作为普通的HPLC根本不能承受这样的梯度，UPLC才能用这样的梯度。另外，TFA截止波长是230左右，220nm下肯定基线很难看。
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wjyyh1983
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2015/6/4 12:23:56 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sepuyiqicaozuo(sepuyiqicaozuo) 发表:
水换成屈臣氏的水试下。
现在用的就是屈臣氏的水
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2015/6/4 12:29:46 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
波浪线可能是TFA影响的，基线有漂移应该是梯度导致，您这95-5%的变化幅度有点大
AB相的TFA浓度一样，应该从头到尾，TFA浓度不会改变的。忘记说了，基线是从4分钟开始往下移的，除非是220nm下水的吸收比乙腈吸收要大。
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wjyyh1983
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2015/6/4 12:32:20 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
梯度太急了，1100作为普通的HPLC根本不能承受这样的梯度，UPLC才能用这样的梯度。另外，TFA截止波长是230左右，220nm下肯定基线很难看。
我们总共4套agilent 1100都在用同样的方法，只有这一套有这样的问题。
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浪淘沙隐
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2015/6/4 12:36:03 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjyyh1983(wjyyh1983) 发表:
我们总共4套agilent 1100都在用同样的方法，只有这一套有这样的问题。
那真很神奇，1100能在2分钟内恢复初始状态，理论上1.0流速需要至少5分钟。
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浪淘沙隐
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2015/6/4 12:38:36 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
基线漂移是正常的，应该是水质不稳定的原因，我这就是这样，有时候基线向上漂移，有时向下漂移。
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：持续应助
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