主题:【已应助】如何调整梯度 让保留时间都差不多的分开 我上传图片 帮忙分析 谢谢,有发一个帖子。。

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wretkbss
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大家先看一下 ,我现在的梯度(见附件1),然后是这16种物质的出峰时间(附件2),A:0.1%甲酸水,B:甲醇,

时间都集中在了4到10min,我想让他们的时间分开一点儿,不要挨得太近,例如:里面有俩个5.9min,俩个5.8min,这样这么能分开一些,还不影响其他的???

我想知道调整梯度时的原则,我最初的时候,由于出峰时间集中在浓度为80%-95%B(4-12min)的那个区间,然后我就把这个区间的时间延长了,浓度没变,发现加过不好,我又把80到95区间细致分了下变成80到90,90到95,又发现出峰都集中在了80到90,我就以此类推直到现在这个结果。。。。。。

效果貌似有点儿起色,但是我不满意,希望大神详细指导指导,我对这个梯度的调整无语了,不懂,是不是我的方式错了,不应该这样调整
PS:我进的是混标,浓度1ppm,我这个峰型可以吗?除了图片“保留时间3”的第一个峰外,其他的怎么样,可以直接用了吧?不用重新做了吧。。。。。。。拜谢各位大神

推荐答案:wretkbss回复于2015/06/16
统一回复,感谢大家对我的帮助,回复的有点儿晚,按照大家的提示,我试了试,起始最低的比例试了5%,然后10%也试了,效果也是平平,但是重叠还是比较大,分不开了。。。。。不过对于计算以及后期的分析木有影响,所以我就追求了一下峰型以及峰高什么的,让它们好一些

我个人分析认为,这几种物质在混合的时候有可能相互都会有一些微量的干扰,本身标品也还有其他的物质,所以分不开也没关系啦。不影响我的计算和结果就好

最后谢谢各位的帮忙,由于一直在做实验没上论坛,再次感谢~~~~~~~
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可以试试乙腈。80-82-85已经很细了,楼主有没有试过B相比例变小一点,梯度变大一点呢?比如起始是20,然后20-60-90这样呢?
wretkbss
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换乙腈呀  目前还木有换  本打算先试试甲醇的  物质多了就是麻烦    太费时间了 
wretkbss
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原文由 八杯水(djj85411) 发表:
可以试试乙腈。80-82-85已经很细了,楼主有没有试过B相比例变小一点,梯度变大一点呢?比如起始是20,然后20-60-90这样呢?
那个低的没有试过,我感觉从这个情况上来看,出峰应该是在高浓度的有机相,所以低浓度的是不是木有多大的意义呀?纯属个人想法  求指点
hujiangtao
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原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
甲醇的分离效果没有乙腈好
enen  我今天试试    晚一点儿上图片  谢谢你
cxq19871003
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原文由 wretkbss(v2970297) 发表:
大家先看一下 ,我现在的梯度(见附件1),然后是这16种物质的出峰时间(附件2),A:0.1%甲酸水,B:甲醇,

时间都集中在了4到10min,我想让他们的时间分开一点儿,不要挨得太近,例如:里面有俩个5.9min,俩个5.8min,这样这么能分开一些,还不影响其他的???

我想知道调整梯度时的原则,我最初的时候,由于出峰时间集中在浓度为80%-95%B(4-12min)的那个区间,然后我就把这个区间的时间延长了,浓度没变,发现加过不好,我又把80到95区间细致分了下变成80到90,90到95,又发现出峰都集中在了80到90,我就以此类推直到现在这个结果。。。。。。

效果貌似有点儿起色,但是我不满意,希望大神详细指导指导,我对这个梯度的调整无语了,不懂,是不是我的方式错了,不应该这样调整
PS:我进的是混标,浓度1ppm,我这个峰型可以吗?除了图片“保留时间3”的第一个峰外,其他的怎么样,可以直接用了吧?不用重新做了吧。。。。。。。拜谢各位大神


我也讲讲自己的看法吧,欢迎各高手批评指正:
        一、确实可将甲醇换成乙腈试试,因为乙腈的洗脱能力比甲醇强;
        二、正如3楼所说,你的初始有机相比例太高,需要调节更低点;
        三、液相涉及到分离度时,可以试着改变下流动相A的酸百分含量。
该帖子作者被版主 djj854113积分, 2经验,加分理由:讨论
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2015/6/5 19:13:16 Last edit by cxq19871003
八杯水
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原文由 wretkbss(v2970297) 发表:
那个低的没有试过,我感觉从这个情况上来看,出峰应该是在高浓度的有机相,所以低浓度的是不是木有多大的意义呀?纯属个人想法  求指点
你试试低B相吧。出峰在高浓度没错,但是你现在的问题是要分离呀。B相差别太小那分离度自然也小了。而且只是起始浓度低,后面你一样可以升到高浓度啊,比如90%,甚至95%!
wretkbss
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原文由 cxq19871003(cxq19871003) 发表:

我也讲讲自己的看法吧,欢迎各高手批评指正:
        一、确实可将甲醇换成乙腈试试,因为乙腈的洗脱能力比甲醇强;
        二、正如3楼所说,你的初始有机相比例太高,需要调节更低点;
        三、液相涉及到分离度时,可以试着改变下流动相A的酸百分含量。


恩恩,谢谢你的解答
1、 乙腈试过了    效果没有甲醇的好  我指的是峰型,  然后乙腈分离出来 是相对有一点儿的改变  但是也有部分的重合  而且峰型比较丑~~
2、初始的调低了  改成了30%  效果没有出现立竿见影的效果
3、酸度试过了  0.1%、0.05%、0.15%、0.2%  然后就没再试了  还是0.1%的相对好一些。
PS:现在重合的保留时间也不多,4个, 然后实验室的前辈说,也没有必要完全所有的分开,后面的计算主要有质谱的工作来完成,不会受到影响的,那我不分开了也可以吧?    还有想问问:当时在优化质谱条件的时候,丰度高的我用做了定量子离子,低的子离子用做了定性的,现在他们的保留时间是一致的,但是峰重合的时候,定性子离子的峰太小了,几乎都被定量的掩盖了,这个有影响吗?就是定性的峰相对定量的小太多,希望没有影响~~~~~~~~~~~~~~~
该帖子作者被版主 djj854113积分, 2经验,加分理由:反馈
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