主题：【分享】Agilent 1100液相基本操作步骤

A g i l e n t 1 1 0 0液相基本操作步骤

( 一) 、开机：
1 、 打开计算机, 进入 W i n d o w sN T （或 Windows2000 ） 画面, 并运行 B o o t pS e r v e r 程序。
2 、打开 1 1 0 0L C各模块电源。
3 、待各模块自检完成后，双击 I n s t r u m e n t1O n l i n e图标，化学工作站自动与1 1 0 0 LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control鐀画面, 单击”View”菜单中Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampli
ng diagram”，使其命令前有錀√鐀标志，来调用所需的界面。
5 、把流动相放入溶剂瓶中。
6 、打开 P u r g e阀。
7 、单击 P u m p图标，出现参数设定菜单，单击 S e t u pp u m p选项，进入泵编辑画面。
8、设 F l o w ：5 m l / m i n ，单击 O K 。
9 、单击 P u m p图标，出现参数设定菜单，单击 P u m pc o n t r o l选项，选中 O n ，单击 O K ，则系统开始 P u r g e ，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止, 切换通道继续 P u r g e ，直到所有要用通道无气泡为止。
1 0 、单击 P u m p 图标，出现参数设定菜单，单击 P u m pC o n t r o l选项，选中 O f f ，单击 O k关泵， 关闭P u r g e v a l v e 。
1 1 、单击P u m p图标，出现参数设定菜单，单击 S e t u pp u m p选项，进入P u m p编辑画面，设 F l o w ：1 . 0 m l / m i n 。
1 2 、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例） ，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击 O k 。
（二）数据采集方法编辑：
1 、开始编辑完整方法：从錀M e t h o d 鐀菜单中选择錀E d i te n t i r em e t h o d 鐀 项，如上图所示选中除錀D a t a a na l y s i s鐀外的三项，单击 O k ，进入下一画面。
2 、方法信息：在錀M e t h o dC o m m e n t s 鐀中加入方法的信息（如：方法的用途等） 。单击 O k进入下一画面。
3、泵参数设定：（以二元泵为例）在錀F l o w 鐀处输入流量, 如 1 m l / m i n ，在錀S o l v e n tB 鐀处输入 7 0 . 0 , ( A = 1 0 0 - B ), 也可I n s er t一行T i m e t a b l e , 编辑梯度。在錀P r e s s u r eL i m i t sM a x 鐀处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。单击 O k进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:选择合适的进样方式,如图所示，进样体积 1 . 0 u l, 洗瓶位置为 6号。 錀S t a n d a r dI n j e c t io n 鐀- - - - 只能输入进样体积，此方式无洗针功能。 錀I n j e c t i o nw i t hN e e d l eW a s h 鐀- - - - 可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。 錀U s ei n j ec t o rp r o g r a m 鐀- - - 可以点击 E d i t键进行进样程序编辑。点击 O k进入下一画面。
5 、柱温箱参数设定:
● 在鐀T e m p e r a t u r e 鐀下面的方框内输入所需温度, 并选中它, 点击鐀m o r e > > 鐀 键,
如图所示, 选中鐀S a m ea sl e f t 鐀- - - 使柱温箱的温度左右一致。
● 点击 o k 进入下一画面。
6 、V W D检测器参数设定:
● 在鐀W a v e l e n g t h 鐀下方的空白处输入所需的检测波长, 如 2 5 4 n m , 在鐀P e a kw i d t h( Re s p o n s et i m e ) 鐀下方点击下拉式三角框, 选择合适的响应时间,如> 0 . 1 m i n ( 2 s ) 。
● 在 T i m e t a b l e中可以錀I n s e r t 鐀一行，输入随时间切换的波长，如 1 m i n ，波长= 3 00 n m 。点击 o k进入下一画面。
7 、D A D检测器参数设定:
● 检测波长:2 5 4 n m , B W = 3 0 n m , 参比波长= 3 5 0 n m , B W = 1 0 0 n m ;
● 检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽 B W ： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽 B W ：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用 1 0 0 n m作为缺省值。P e a kw i d t h （R e s p o n s et im e ） ：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。S l i t 需狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。
● 点击 O k 进入下一画面。
8 、R I D检测器参数设定:
● 色谱条件:进样体积:2 0 u l。 光学单元温度: O f f。极性:正 。 峰宽( 响应时间): 4 s 。
● 如图所示:錀O p t i c a lU n i tT e m p e r a t u r e 鐀- - - 若环境温度控制在넀2 ℃, 设定为O f f ,若环境温度不稳定, 则设定光学单元温度为高于环境温度 5度, 以防样品在池中沉淀。 錀P e a kw i d t h 鐀- - - 大多数分析设为 4 S ，只有在高速分析下设为更短。 錀A u t o m a t i cr e c y c l i n ga f t era n a l y s i s 鐀- - - 在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。
● * * * * *点击 R I D图标，选择 R I D C o n t r o l：H e a t e r设为 O n ，若要循环流动相，必须将錀R e c y c l i n gV a l v e 鐀设为 O N 。手动 p u r g e参比池，将其设为 O n ，并输入 P u r g e时间。
9 、F L D检测器参数设定:
色谱条件：
● 样品：P / N0 1 0 1 8 - 6 8 7 0 4 用甲醇稀释为 1 : 1 0 。
● 进样体积：5 u l 。
● 柱温箱: 3 0 ℃ 。 E X = 2 4 6 n m ,E M = 3 1 7 n m, P M T = 1 0 。
● 响应时间= 4 s . 停止时间： 出峰完毕。
● E x c i t a t i o nA :激发波长: 2 0 0 - 7 0 0 n m , 步长为1 n m , 或 Z e r oO r d e r 。
● E m i s s i o n :发射波长:2 8 0 - 9 0 0 n m ,步长为 1 n m , 或 Z e r oO r d e r 。
● P M T :大多数应用适当的设定值为 1 0 , 若高浓度样品峰被切平头, 则减少 P M T值。
● 錀P e a kw i d t h 鐀 ：大多数应用设为4 s ，只有快速分析采用小的设定值。
● M u l t iE x： 多波长及光谱（激发） 。
● M u l t iE m ：多波长及光谱（发射） 。
● 同时可以输入范围 R a n g e 、步长s t e p 、采集光谱。
1 0 、在錀 R u nt i m ec h e c k l i s t鐀中选中錀D a t aa c q u i s i t i o n 鐀 ，单击 O k 。
1 1 、单击錀M e t h o d 鐀菜单，选中錀S a v em e t h o da s 鐀 ，输入一方法名，如錀t e s t 鐀 ，单击 O k 。
1 2 、从菜单 錀V i e w 鐀中选中鐀O n l i n es i g n a l 鐀 , 选中 W i n d o w s1 , 然后单击 C h a n g e钮, 将所要绘图的信号移到右边的框中, 点击 O k . ( 如同时检测二个信号, 则重复 1 2 , 选中 W i n d o w s2 ) 。
1 3 、从錀R u n c o n t r o l鐀菜单中选择錀S a m p l ei n f o 鐀选项，如上图所示，输入操作者名称，在錀D a t af i l e鐀中选择錀M a n u a l 鐀或錀P r e f i x 鐀 。区别: M a n u a l - - 每次做样之前必须给出新名字, 否则仪器会将上次的数据覆盖掉。 P re f i x 需在 P r e f i x框中输入前缀，在 C o u n t e r框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如 v w d 0 0 0 1 ，v w d 0 0 0 2 蔀蔀。
1 4 、从 I n s t r u m e n t菜单选择 S y s t e mo n 。
1 5 、等仪器 R e a d y ，基线平稳，从 M e t h o d菜单中选择錀R u nm e t h o d 鐀 ，进样。（D A D ,V W D 色谱图如下所示： ）
（三） 、数据分析方法编辑:
1 、 从錀V i e w 鐀菜单中，单击錀D a t aa n a l y s i s 鐀进入数据分析画面。
2 、 从錀F i l e 鐀菜单选择錀L o a ds i g n a l 鐀 ，选中您的数据文件名，如下图所示。单击 O k 。
3 、 做谱图优化, 从錀G r a p h i c s 鐀菜单中选择錀S i g n a lo p t i o n s 鐀选项， 。从 R a n g e s中选择A u t os c a l e及合适的显示时间，单击 o k , 或选择鐀U s eR a n g e s 鐀 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。
4 、积分:
( 1 ) 、从錀I n t e g r a t i o n 鐀中选择 錀A u t oi n t e g r a t e 鐀, 如积分结果不理想, 再从菜单中选择錀I n t e g r a t i o n E v e n t s 鐀选项，选择合适的S l o p es e n s i t i v i t y ，P e a kw i d t h ，A r e ar e j ec t ，H e i g h tr e j e c t 。
( 2 ) 、从錀I n t e g r a t i o n 鐀菜单中选择錀I n t e g r a t e 鐀选项， 则数据被积分。
( 3 ) 、如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
( 4 ) 、单击左边錀√鐀图标，将积分参数存入方法。
5 、打印报告:
( 1 ) 、从錀R e p o r t 鐀菜单中选择錀S p e c i f yr e p o r t 鐀选项，进入如上画面。
( 2 ) 、单击錀Q u a n t i t a t i v e R e s u l t s 鐀框中 C a l c u l a t e右侧的黑三角，选中 P e r c e n t （面积百分比） ，其它选项不变。
( 3 ) 、单击 O k .
( 4 ) 、从錀R e p o r t 鐀菜单中选择錀P r i n tr e p o r t 鐀 ，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则单击 R e p o r t底部的錀P r i n t 鐀钮。
( 四) 、关机:
● 关机前，用 1 0 0 % 的水冲洗系统 2 0 分钟，然后用有机溶剂冲洗系统 1 0 分钟（如A C N ） ，然后关泵， （适于反相色谱柱） 。
● 退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用s h u td o w n关）