主题：【原创】异构体混合物分离制备放大经历

异构体在色谱上通常比较难分，要想制备出单体，更是困难，下面讲一下前段时间做的一个异构体制备的经历。
样品为异构体混合物，易溶于甲醇，微溶于水，为尽量避免溶剂效应，用甲醇溶样后，用水稀释一倍，过滤，备用。
原样检测结果是下图这个样子，目的是分离主成分，纯度达到99%

序号  保留时间 名称  浓度      峰面积
───────────────────────
1      7.515          92.97      1146511
2      8.107          7.027      60677
───────────────────────
总计                  100        1207188
制备条件1
仪器：高压制备一体机（agela CHEETAH-HP100）
色谱柱：DAC-50  Venusil  XBP C18(2)    300g（填装）（10um  100Å）
流动相：A：水
            B：甲醇
流速：80ml/min
波长：210nm，230nm

流动相A：B=77:23
上样量：170mg

170mg上样量制备图谱

23.1-25.8min馏分检测图谱

序号  保留时间 名称  浓度      峰面积
───────────────────────
1      7.505          99.9      7727046
2      8.078          0.1048    8110
───────────────────────
总计                  100        7735156
结论：上样量170mg，得到纯度99.9%产品66mg，收率38.8%

制备条件2（优化流动相比例）
流动相A：B=78:22
上样量：422mg

422mg上样量制备图谱

26.6-30.3min馏分检测图谱

序号  保留时间 名称  浓度      峰面积
───────────────────────
1      7.881          99.19      1762194
2      8.493          0.8076    14346
───────────────────────
总计                  100        1776540
结论：上样量422mg，得到纯度99.19%产品182mg，经过条件优化，收率提升至43.1%

制备条件3（加大上样量，并优化流动相比例）
流动相A：B=80:20
上样量：1000mg

1000mg上样量制备图谱

33.2-38.8min馏分检测图谱

序号  保留时间 名称  浓度      峰面积
───────────────────────
1      10.594          99.02      7134816
2      11.456          0.9755    70285
───────────────────────
总计                  100        7205101
结论：上样量1000mg，得到纯度99.0%的白色粉末状产品392mg，收率39.2%

制备条件4（上样量加大到1.5g）
流动相A：B=80:20
上样量：1500mg

1500mg上样量制备图谱

5.0-6.0min馏分检测图谱

序号  保留时间 名称  浓度      峰面积
───────────────────────
1      7.781          93.37      1095537
2      8.428          6.633      103520
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总计                  100        1199057
结论：上样量体积太大，5min大部分样品直接洗下来。
总结：

上样量/mg	产品量/mg	纯度/%	得率/%
170	66	99.9	38.8
422	182	99.19	43.1
1000	392	99.0	39.2
1500	上样体积太大，大部分样品没保留

由上述实验结果对比得出：流动相选用20%甲醇，上样量1000mg条件更合理。