正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是: (1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性,溶剂不能与固定相互溶,能保证色谱柱的稳定性;必须能溶解样品,且不能产生强溶剂效应,所谓强溶剂效应是指:当样品进样时,有可能出现峰展宽,最佳的样品溶液组成和体积将会保持在10%甚至更低, ,当样品溶剂与流动相溶剂强度不同时,换句话来说,也就是样品未用流动相溶解,有些样品分子溶解在强溶剂(100%ACE),并随强溶剂流过柱子,而有些则溶解在流动相中,从而导致峰分叉或展宽。 (2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。可以在网上搜索一下溶剂的紫外截止波长。 对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。 (3)高纯度。由于高效
液相灵敏度高,对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳,或产生“伪峰”。痕量杂质的存在,将使截止波长值增加50~100nm。 (4)化学稳定性好。不能选与样品发生反应或聚合的溶剂。 (5)低粘度。若使用高粘度溶剂,势必增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度过于低的溶剂也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它们易在色谱柱或检测器内形成气泡,影响分离。