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主题：【求助】氨基酸自动分析仪L-8900泵压和结果的问题，求助

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发表于：2016/02/25 14:26:30 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师好，我最近在做鱼肉中的氨基酸分析，现在遇到问题，想请教各位，谢谢~
现在仪器在0.35ml/min走R3的时候，泵压是0.2-0.3mpa，但是走R1和R2的时候，泵压就会上升到1.9-2.3mpa，而且随着我进样，泵压还会上升，不知道是不是我R1和R2的问题，想问下各位用的流动相药品都是哪个厂家的。
另外在我上机的过程中，同一批处理的样品会出现前个别样品的前几个峰出不完全，个别样品的峰又可以出完全，具体结果如图：

这个是可以出峰完全的

像这个样品的前几个峰就出不完全，
这是同一批次样品，相同处理，相同条件上机下做的，想请各位老师帮忙看看，是我前处理的那个部分有问题了，各位有没遇到过类似的问题，谢谢大家
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tianru的爸爸
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2016/2/25 19:39:49 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
出峰完全？不懂。
是几个峰的分离度不够的意思吗？第二张图的前面有四个峰没有基线分离。
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豆豆QQ
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2016/2/26 13:50:55 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:
出峰完全？不懂。
是几个峰的分离度不够的意思吗？第二张图的前面有四个峰没有基线分离。


是的，是这个意思，老师您遇到过这种问题吗？怎么解决呢？
我现在还遇到一个问题了，就是泵2的泵压一直在上升，我也尝试换流动相，还是不行。
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tianru的爸爸
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2016/2/28 6:46:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没用过该仪器。
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tianru的爸爸
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2016/2/28 6:50:50 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这类仪器基本原理应该是反相HPLC。
如果只有其中某一组峰分离度不够，或者变差，就比较奇怪。
最好仔细研究一下，流动相，以及梯度。
因为一般来说，如果分离度变差会全部如此。
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2016/3/4 16:13:54 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个很简单：
1、R3的压力当然比R1R2低！要是高就出问题了！
2、随着你进样个数的增多，你这么跑下去，泵压力要是不高就不正常了！别找试剂的问题了！先老老实实的去看标准吧！
3、解决压力升高的问题，请参考2中给的建议！参考标准，好好查查没分开的峰水解的时间酸浓度等是否真的一致！
  （论坛里，之前看到一篇测氨基酸的原创，他无比坚信他的样品前处理方法很牛逼，讲真，他那真的一点都不牛逼！有网友质疑，他还牛逼哄哄反驳，看他那么牛逼，我都懒得回他，让他继续错下去好啦！）
4、说到重点，你第二个图不是出峰不完全，是你样品没处理好（样品没处理好，导致压力升高！），再重新处理一次样品吧！


5、这类问题，还是直接咨询厂家吧，论坛里测氨基酸的很少，要不然也不至于一篇样品前处理都错了的文章还能获奖？
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2016/3/4 16:15:50 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:
这类仪器基本原理应该是反相HPLC。
如果只有其中某一组峰分离度不够，或者变差，就比较奇怪。
最好仔细研究一下，流动相，以及梯度。
因为一般来说，如果分离度变差会全部如此。
第二个没分好的图，这个样品，就是调个1年，都不可能调好，是他样品没处理好，与仪器、分析程序、分离柱一毛钱关系都木有。
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2016/3/4 16:17:38 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 豆豆QQ(v3066670) 发表:
是的，是这个意思，老师您遇到过这种问题吗？怎么解决呢？
我现在还遇到一个问题了，就是泵2的泵压一直在上升，我也尝试换流动相，还是不行。


换什么试剂也解决不了压力升高的问题！
按照标准好好处理样品，然后，不用换试剂，压力就不会升高了！
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豆豆QQ
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2016/3/14 15:21:40 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ld321(ld321) 发表:
换什么试剂也解决不了压力升高的问题！
按照标准好好处理样品，然后，不用换试剂，压力就不会升高了！
谢谢老师，后来我反复更换流动相，发现都不行，最后发现是我管路脏了，用水和甲醇反复清洗，后来泵压就下来了。峰分离的不好，应该是我前处理的过程中盐酸在蒸干的过程中没有蒸干，导致样品的酸浓度偏高，峰分离不好~~谢谢您
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ld321
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2016/3/24 8:56:03 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 豆豆QQ(v3066670) 发表:
谢谢老师，后来我反复更换流动相，发现都不行，最后发现是我管路脏了，用水和甲醇反复清洗，后来泵压就下来了。峰分离的不好，应该是我前处理的过程中盐酸在蒸干的过程中没有蒸干，导致样品的酸浓度偏高，峰分离不好~~谢谢您
就说么，跟试剂没关系，您还反复更换试剂，要是木有看不出问题所在，会这么肯定的告诉您与试剂没关系吗？会直接告诉您样品要按照标准来处理吗？
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