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液相色谱（LC）

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主题：【求助】液相样品溶剂与流动相不一样。

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ykk

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发表于：2016/05/20 21:35:53 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

大家好，本人液相小白一个。想问一个问题：我现在的样品用的是甲醇溶解，但是流动相是水和乙腈梯度洗脱，0-10min，25%乙腈，10-20min,25-34%乙腈，20-25min,34%乙腈。C18反相柱，1.0ml/min，205nm。这里流动相和溶解样品的溶剂不一样，有什么问题吗？除了溶剂峰以为还有什么其他问题吗？我的样品乙腈很难溶，但是水溶性很好。文献中大多数都是都是乙腈和0.2%磷酸水溶液和甲醇溶样。我的样品是一个植物的提取物。希望大家能够提出一些建议给我。谢了。

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2016/5/21 15:13:12 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

乙腈和甲醇互溶，没有影响

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有水有渝

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2016/5/21 16:49:30 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

水溶性很好的话可以直接使用25%乙腈当溶剂

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一片枫叶

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2016/5/21 18:30:25 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品的水溶性好说明样品的极性相对较强，梯度洗脱浓度增大说明样品保留较强，溶解样品用到磷酸调PH值说明样品在酸性条件下以分子状态存在易于得到较好的保留和峰型，因此，在优化色谱分析条件的时候要综合考虑，以达到最好的保留和分离以及最好的峰形。
以己之见：样品要用规定的条件溶解，流动相也要用一定比例的磷酸调PH值。

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ykk

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2016/5/24 21:14:21 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
样品的水溶性好说明样品的极性相对较强，梯度洗脱浓度增大说明样品保留较强，溶解样品用到磷酸调PH值说明样品在酸性条件下以分子状态存在易于得到较好的保留和峰型，因此，在优化色谱分析条件的时候要综合考虑，以达到最好的保留和分离以及最好的峰形。
以己之见：样品要用规定的条件溶解，流动相也要用一定比例的磷酸调PH值。

你好，问下，能问几个问题吗？1，我这是皂苷类的物质，用水和25%乙腈溶样的话晃动会有起泡的而且我担心水溶样的话那就是标准品也得水溶，这样放不了多久就会有微生物产生影响,2，我这现在的方法我的梯度只是到34%，就洗出来我要的物质，如果后面再加大乙腈浓度就会出现其他的杂峰，那我这液相方法还要继续加一段洗出其他的杂质。不加的话，现在发现大概做六个样左右就柱压就会上升一点。这会有影响吗？谢谢，打扰了。

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