主题:【已应助】酚试剂分光光度法测甲醛,标准曲线,吸光度上不去!

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癫癫
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酚试剂分光光度法测甲醛,标准曲线后面高浓度的吸光度一直上不去,停留在0.3几,标准使用液是买的,酚试剂之前用的天津的后来买了不知哪里的进口,还是不行,显色剂也用0.1mol的盐酸配的,水浴三十度,显色15分钟。后来我配标液的时候加了三十毫升的吸收液,吸光度有点上去了,最高点可以达到0.68多,相关系数0.9993,到底是什么原因?空白是0.29这样
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有前辈指点一下吗?我一直认为可能是酚试剂的原因。要不要标液自己配制做做看?
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2016/6/3 8:53:01 Last edit by jshbhh
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质控也不准,明显偏低!!!!买来的标液我都是用水稀释的,盲样也是用纯水稀释的?难道都要吸收液稀释吗?
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2016/6/3 8:53:54 Last edit by jshbhh
癫癫
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玲儿响叮当
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原文由 癫癫(v3041434) 发表:有前辈指点一下吗?我一直认为可能是酚试剂的原因。要不要标液自己配制做做看?
对于同一个浓度的甲醛标准溶液,反应时的温度和时间对反应有显著影响。温度越低,显色完全所需要的时间越长。在10℃时,显色完全需要40min;15℃时,需要30min;20℃时,需要25min;而在40℃时,则10min就显色彻底。故显色时所需要的最佳温度和时间是40℃时(可采用水浴锅以保持水温恒定)显色10min。
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原文由 癫癫(v3041434) 发表:空白是0.029这样,上面说错了
硫酸铁铵的量不宜过多,否则空白管吸光度值高,影响比色,以加1%硫酸铁铵0.4ml为好
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原文由 癫癫(v3041434) 发表:质控也不准,明显偏低!!!!买来的标液我都是用水稀释的,盲样也是用纯水稀释的?难道都要吸收液稀释吗?
显色剂pH值控制在4为好,此时吸光度达到最大且最稳定。
玲儿响叮当
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原文由 癫癫(v3041434) 发表:有前辈指点一下吗?我一直认为可能是酚试剂的原因。要不要标液自己配制做做看?
甲醛标准曲线绘制时,用于配置甲醛标准色列管的甲醛标准溶液中必须加入酚试剂原液放置30min后待甲醛与酚试剂反应完全后再移取溶液进行显色实验,否则溶液不显色。酚试剂原液最好现用现配,如果放置时间过长会引起实验误差。
wfuse001
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酚试剂原液不能过久存放,放冰箱最多三天。否则结果肯定要受影响。显色的温度越高,吸光度越高。楼主可以从这两方面去考虑。
wfuse001
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按照标准规定,硫酸铁铵只能加0.4ml,量大了会严重影响显色
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