推测：1：如果流通池中有吸收紫外光（254nm）和可见光（656nm）的样品或流通池中有气泡，波长校正功能和波长准确度检查功能将不能正常运行——使用不具有此紫外光或可见光的流动相清洗或吹赶流通池的气泡。
2：关闭仪器，重新启动。
2：是否：超声脱气+在线脱气=系统没有气泡
答：1：脱气机一般脱的是流动相的小气泡，几乎是看不到的那些。而对于流动相中的大气泡效果不是很好。
2：流动相负压抽滤，气泡会溶解度减小而溢出，以减小脱气机的负荷，达到最好的效果。
3：安捷伦1260，这种3D信号重叠图怎么改变时间轴范围呢？单个信号图显示知道在哪里改动。一重叠时间就变回最原始的。

讨论问题：结论需坛友支持！
4：安家的灯自检，失败这项是说明哪里的问题呢？

描述：之前的新灯噪音太大，我都打算要更换了。昨天重新装上后，发现可以接受了，但做了灯的自检就有这项失败。之前在254nm的噪音大概有10mAU。然后用了旧灯，放了几天重新换新灯就噪音就变成0.1mAU，真心不懂。
结论：Spectral flatness 测试失败工程师说还是噪音问题，延长开灯时间，再检测，通过了。
5：运行过程中lamp和power都会闪烁，lamp变红是怎么回事。

推测：1：工程师说是光路问题，灯能量值有点低。
2：工程师说光路问题，你们的液相光路有没有检修过，机子有五年了。
6：蛋白质用阳离子交换色谱分离的原理
答：阳离子交换色谱柱的交换中心为酸性基团（带负电）；蛋白质为两性电离化合物（含有碱性的氨基-NH2与酸性的羧基_COOH），在酸性条件下，带正电荷（氨基接受氢离子，碱负酸正原则），根据电荷异性相吸的原理，如果是酸性条件下，就应该采用阳离子交换柱进行吸附-解吸附的离子交换过程。
7：出现这种峰是什么原因——一种物质两个峰：一大一小。进样量减半后，峰仍然没有改变。

描述：我想不通的是：我就做了醋酸水溶液，150-5000PPM浓度。用10%甲醇和90%的 0.2%三氟乙酸流动相。C18的柱子，柱箱温度40℃。柱子怎么就报废了？而且2台机同时报废。
推测：1：两个小肩峰，看看有没有预柱，是不是预柱脏了该换了——有保护柱的话就拿掉保护柱试试，没保护柱基本上就是柱子坏了。
2：管路死体积也会造成肩峰——不会的，两台同时坏柱子。
3：色谱柱填料基质溶解流动相长菌。
4：方法缺陷——九个月坏了三根同样的柱子。
5：三氟乙酸浓度过高，PH值太低，普通C18受不了，换根耐酸的——0.2的TFA PH在2以下了。
分析：色谱柱耐酸范围一般写2-9，基本上你用2的话，寿命不会很长，ph=2.5还可以。
一般这种条件直接推荐耐酸的C18。用EDTA或者离子对做流动相对柱子损伤都挺厉害，一般专注专用。
高比例水相先冲洗盐，中间一段时间50%有机相流动相冲洗洗，后面高比例有机相 ——等度冲洗离子对对色谱柱的污染。
结论：提供的方法有问题。
8：岛津lc-20a 液谱，泵一直报警，报警信息：ERR LEAK DETECT。检查了不漏液，不能执行purge 功能。
推测：1：漏液传感器受潮——检查没有问题，已用吹风机吹干，依然报警。
9：国内外梯度设置的不同：这俩个方法比较下，觉得哪个好

讨论：1：第一种方便，是国内通用的方法，但是故障率高；第二种麻烦，稳定性好，对仪器要求小点。
2：第二种流动相不利于长期保存，盐有析出危险。好处：基线更稳。
3：要是我也选第一种，我比较懒，而且，做完把盐直接倒了就行，第二种都是有机相麻烦处理，配置也麻烦点。但第一种还是比较暴力，第二种看起来温柔体贴点。
4：第二种的好处就是基线更稳，相对来说，使用纯乙腈可以冲洗的更干净，防止有残留，从起点平衡其实差不多。

分歧：1：梯度最后用纯有机相冲的话相当于用完后清洗色谱柱了，等于每次从零开始平衡色谱柱。
2：一般剃度洗脱的程序最后，会调回程序初始比例，方便接着做下一针。
3：第二种的好处就是基线更稳，相对来说，使用纯乙腈可以冲洗的更干净，防止有残留，从起点平衡其实差不多。
10：色谱图怎么会走成这样怎么回事——国产机，工作站没有压力曲线，压力浮动在1MPa，峰面积重复性差，以前比较正常。

但就压力波动而言推测：1：压力波动大——输液系统有气泡。
2：进样时，从进样阀流出的液体较多影响峰面积的重复性——检查进样阀。
3：进样时压力波动仪器都有这种情况，只是大小而已——我以前遇到过仪器平衡时压力都正常，只要一进样品压力就不稳，忽高忽低。我那是压力波动很大以致超出最高限数值，后来排查原因是进样针座那里堵了。
4：空调影响压力，使压力不稳，
5：漏液也会造成压力波动。
6：如果是保留时间正常，只是峰面积重复性差就是进样阀的问题了。
11：我之前一直做的条件，流动相是乙腈—三乙胺磷酸水溶液，样品用乙腈稀释的。这次平衡了3小时跑基线一直不平，怎么回事

推测：1：国产溶剂在检测波长下具有紫外吸收。
2：溶剂效应——用甲醇溶解峰型有所改善。用流动相溶解样品峰型会更好。

3：乙腈三乙胺磷酸溶液，在线混合所致。
标样峰如下图：

样品目标峰

4：样品峰吸收太低了，方法肯定有问题。
5：过滤的方法不对也有可能导致出现类似您这样的结果——样品溶剂是甘草酸水溶液，算是水系吧，离心甩出来后，以为这就算离心了，就没过滤。
6：如果流动相比较复杂，国产的泵不一定能够满足，出问题的概率比较大，液相看泵的稳定性与精度。
12： uplc和hplc的区别
答：超效液相色谱技术(UPLC)是近年来液相色谱技术的新发展,通过增加液相系统耐高压性能,降低色谱柱固定相粒径、色谱柱内径及长度,从而减小了理论塔板高度,增加了理论塔板数,实现了缩短分析时间,增加色谱峰容量,提高分离度和灵敏度的作用,满足了对色谱分析的高效、快速、高通量等性能的要求。