1:压力波动,紫外检测器出现报错信息:check no good 怎么回事![]()
推测:1:如果流通池中有吸收紫外光(254nm)和可见光(656nm)的样品或流通池中有气泡,波长校正功能和波长准确度检查功能将不能正常运行——使用不具有此紫外光或可见光的流动相清洗或吹赶流通池的气泡。
2:关闭仪器,重新启动。
2:是否:超声脱气+在线脱气=系统没有气泡答:1:脱气机一般脱的是流动相的小气泡,几乎是看不到的那些。而对于流动相中的大气泡效果不是很好。
2:流动相负压抽滤,气泡会溶解度减小而溢出,以减小脱气机的负荷,达到最好的效果。
3:安捷伦1260,这种3D信号重叠图怎么改变时间轴范围呢?单个信号图显示知道在哪里改动。一重叠时间就变回最原始的。![]()
讨论问题:结论需坛友支持!
4:安家的灯自检,失败这项是说明哪里的问题呢? ![]()
描述:之前的新灯噪音太大,我都打算要更换了。昨天重新装上后,发现可以接受了,但做了灯的自检就有这项失败。之前在254nm的噪音大概有10mAU。然后用了旧灯,放了几天重新换新灯就噪音就变成0.1mAU,真心不懂。
结论:Spectral flatness 测试失败 工程师说还是噪音问题,延长开灯时间,再检测,通过了。
5:运行过程中lamp和power都会闪烁,lamp变红是怎么回事。![]()
推测:1:工程师说是光路问题,灯能量值有点低。
2:工程师说光路问题,你们的
液相光路有没有检修过,机子有五年了。
6:蛋白质用阳离子交换色谱分离的原理答:阳离子交换色谱柱的交换中心为酸性基团(带负电);蛋白质为两性电离化合物(含有碱性的氨基-NH2与酸性的羧基_COOH),在酸性条件下,带正电荷(氨基接受氢离子,碱负酸正原则),根据电荷异性相吸的原理,如果是酸性条件下,就应该采用阳离子交换柱进行吸附-解吸附的离子交换过程。
7:出现这种峰是什么原因——一种物质两个峰:一大一小。进样量减半后,峰仍然没有改变。![]()
描述:我想不通的是:我就做了醋酸水溶液,150-5000PPM浓度。用10%甲醇和90%的 0.2%三氟乙酸流动相。C18的柱子,柱箱温度40℃。柱子怎么就报废了?而且2台机同时报废。
推测:1:两个小肩峰,看看有没有预柱,是不是预柱脏了该换了——有保护柱的话就拿掉保护柱试试,没保护柱基本上就是柱子坏了。
2:管路死体积也会造成肩峰——不会的,两台同时坏柱子。
3:色谱柱填料基质溶解流动相长菌。
4:方法缺陷——九个月坏了三根同样的柱子。
5:三氟乙酸浓度过高,PH值太低,普通C18受不了,换根耐酸的——0.2的TFA PH在2以下了。
分析:色谱柱耐酸范围一般写2-9,基本上你用2的话,寿命不会很长,ph=2.5还可以。
一般这种条件直接推荐耐酸的C18。 用EDTA或者离子对做流动相对柱子损伤都挺厉害,一般专注专用。
高比例水相先冲洗盐,中间一段时间50%有机相流动相冲洗洗,后面高比例有机相 ——等度冲洗离子对对色谱柱的污染。
结论:提供的方法有问题。
8:岛津lc-20a 液谱,泵一直报警,报警信息:ERR LEAK DETECT。检查了不漏液,不能执行purge 功能。 推测:1:漏液传感器受潮——检查没有问题,已用吹风机吹干,依然报警。
9:国内外梯度设置的不同:这俩个方法比较下,觉得哪个好![]()
讨论:1:第一种方便,是国内通用的方法,但是故障率高;第二种麻烦,稳定性好,对仪器要求小点。
2:第二种流动相不利于长期保存,盐有析出危险。好处:基线更稳。
3:要是我也选第一种,我比较懒,而且,做完把盐直接倒了就行,第二种都是有机相麻烦处理,配置也麻烦点。但第一种还是比较暴力,第二种看起来温柔体贴点。
4:第二种的好处就是基线更稳, 相对来说,使用纯乙腈可以冲洗的更干净,防止有残留,从起点平衡其实差不多。
分歧:1:梯度最后用纯有机相冲的话相当于用完后清洗色谱柱了,等于每次从零开始平衡色谱柱。
2:一般剃度洗脱的程序最后,会调回程序初始比例,方便接着做下一针。
3:第二种的好处就是基线更稳, 相对来说,使用纯乙腈可以冲洗的更干净,防止有残留,从起点平衡其实差不多。
10: 色谱图怎么会走成这样怎么回事——国产机,工作站没有压力曲线,压力浮动在1MPa,峰面积重复性差,以前比较正常。 ![]()
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但就压力波动而言推测:1:压力波动大——输液系统有气泡。
2:进样时,从进样阀流出的液体较多影响峰面积的重复性——检查进样阀。
3:进样时压力波动仪器都有这种情况,只是大小而已——我以前遇到过仪器平衡时压力都正常,只要一进样品压力就不稳,忽高忽低。我那是压力波动很大以致超出最高限数值,后来排查原因是进样针座那里堵了。
4: 空调影响压力,使压力不稳,
5: 漏液也会造成压力波动。
6:如果是保留时间正常,只是峰面积重复性差就是进样阀的问题了。
11:我之前一直做的条件,流动相是乙腈—三乙胺磷酸水溶液,样品用乙腈稀释的。这次平衡了3小时跑基线一直不平,怎么回事![]()
推测:1:国产溶剂在检测波长下具有紫外吸收。
2:溶剂效应——用甲醇溶解峰型有所改善。用流动相溶解样品峰型会更好。
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3:乙腈三乙胺磷酸溶液,在线混合所致。
标样峰如下图:
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样品目标峰
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4:样品峰吸收太低了,方法肯定有问题。
5:过滤的方法不对也有可能导致出现类似您这样的结果——样品溶剂是甘草酸水溶液,算是水系吧,离心甩出来后,以为这就算离心了,就没过滤。
6:如果流动相比较复杂,国产的泵不一定能够满足,出问题的概率比较大,
液相看泵的稳定性与精度。
12: uplc和hplc的区别答:超效
液相色谱技术(UPLC)是近年来
液相色谱技术的新发展,通过增加
液相系统耐高压性能,降低色谱柱固定相粒径、色谱柱内径及长度,从而减小了理论塔板高度,增加了理论塔板数,实现了缩短分析时间,增加色谱峰容量,提高分离度和灵敏度的作用,满足了对色谱分析的高效、快速、高通量等性能的要求。