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液相色谱（LC）
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主题：【求助】液相空白样走梯度基线不好

浏览0 回复11 电梯直达
renzhang86
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发表于：2016/10/26 18:14:20 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师好，最近刚接触液相色谱，用梯度洗脱进了几针空白（超纯水），跑出的基线起伏很大，出现一些杂峰，重现性不好，也很不好看，基线跑成这样是否正常？怎样改善？
仪器：安捷伦1260，色谱柱：ZORBAX SB C-18    4.6×150mm，5μm，流速：1.2mL/min， 柱温：40 ℃.
梯度:   
时间min水%甲醇%
08020
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352080
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2016/10/26 19:04:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
只走梯度不进超纯水呢？
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夏天的雪
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2016/10/26 20:09:12 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能仪器、色谱柱或者试剂被污染了，用的水是超纯水，甲醇是色谱纯吗？
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renzhang86
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2016/10/26 21:26:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
可能仪器、色谱柱或者试剂被污染了，用的水是超纯水，甲醇是色谱纯吗？
甲醇是赛默飞世尔的色谱级甲醇，只是这超纯水是我们单位的超纯水机制的。
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夏天的雪
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2016/10/27 9:16:31 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 renzhang86(renzhang86) 发表:
甲醇是赛默飞世尔的色谱级甲醇，只是这超纯水是我们单位的超纯水机制的。
仪器，特别是色谱柱或者进样器中有残留时会出峰的
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山河永寂
v3143230
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2016/10/27 10:04:38 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱污染，用1h全梯度进空针清洗色谱柱两次，然后用最初梯度比例进行平衡30min，观察基线变化情况。
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yifan1117
yifan1117
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2016/10/27 11:04:52 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
恩，估计色谱柱有点污染了。
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m3133829
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2016/10/27 21:25:03 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们有时候用Fisher的乙腈会出现一些莫名其妙的杂峰，所以如果冲洗了柱子还是不行可以考虑考虑这方面的问题
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lijing320323
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2016/10/29 12:52:27 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度常出现溶剂峰，是正常的
楼主的就要考虑柱子是否干净，仪器是否冲洗干净了
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flyaway
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2016/10/30 22:04:57 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
水出问题的可能性大
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m3046544
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2016/10/31 21:52:23 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 支点(zhx_fs_ln)发表:只走梯度不进超纯水呢？
柱子是不是新的，看下柱子测试时的流动相，是不是反相的，
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