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主题：【求助】关于多胺类物质的检测

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cobin
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发表于：2017/03/01 13:41:56 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我最近在做胱胺的HPLC检测（245nm处有吸收峰），由于其极性很强，即使用99%的水相，出峰时间也在1分钟左右。
通过查阅去资料，发现可以通过离子对试剂来提高其保留时间，配方如下：50mM NaH2PO4，0.05mM SDS，2% ACN，体系pH用磷酸调至2.7。可奇怪的是换成离子对试剂后反而没有胱胺的峰了。
可能的原因是什么？还有普通的C18柱子是否适合胱胺的检测？
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小鱼儿111126
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2017/3/1 14:36:59 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相中的 离子对试剂SDS与胱胺形成中性物质，在C18上保留增强。当然，如果你的C18能承受高pH的话，流动相不加离子对试剂，换成加氨水，在碱性条件下应该也可以保留的（不过估计楼主的柱子耐受不了）。首先楼主确定，胱胺在245nm处有吸收峰。是不是走的时间不够，胱胺没出来呢？你进了几针都是这样吗？
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：经验分享
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夏天的雪
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2017/3/2 10:06:26 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一是可能生成其他物质改变了吸收波长，二是可能保留很强，没有洗脱下来
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有水有渝
xky0230699
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2017/3/3 9:03:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用亲水柱，另外怎么看结构都不像是245吸收很强的样子，难道S、N上的孤对电子形成了强大的共轭体系？有紫外扫描图谱吗？
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