主题:请教诸位:W灯丝和LaB6灯丝有什么区别?

浏览0 回复13 电梯直达
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黑洞
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原文由 kutoku 发表:
楼上的您好,我想请问一下:您所说的两种灯丝都常用,那有没有出现W灯丝拍照的效果不如LaB6的清晰?怎么表述呢,就是在<25K的放大倍数下,W灯丝所拍的细胞器(如植物细胞的细胞核,质体,叶绿体等双膜结构的细胞器)边缘不如LaB6的清晰,有层次,感觉上用W灯丝拍出来的照片单独看是一点问题都没有,但是和LaB6的一比较,就觉得好像蒙了一层纱,虚得很,而后者所拍的照片连双层膜边缘都能清楚地分辨,您看这到底是电镜自身灯丝啊,极靴什么的性质决定的呢,还是因为我自己调机的本事不到家造成的啊,唉,这个问题困扰我多时,请大虾指点指点吧
ps,如果有可能的话,能不能将JEM-1230的W灯丝换成LaB6的啊,if 可以的话,是不是对电镜的真空度要求得更高啊,会不会直接导致样品抽真空的时间拉长,要做什么样的改进内,请大虾一并回答吧,嘿嘿,多谢多谢!


除了场发射电镜,两种灯丝都可以互换,1230也一样。而你考虑的真空问题,DP泵是可以满足LaB6要求的1X10-4Pa的,不管什么灯丝,样品的抽气时间不要超过10分钟。最好配有ACD,这样可有效的提高一部分真空度。如果没有PEG的话,应该配一个,这样才可以准确地知道真空值。
而对于你所说小于25K的生物图像,两种灯丝是应该看不出区别来的。你提到的用LaB6看到了双层膜边缘,我想这极有可能是由于不同的操作者的手法不同,像光阑的选择,光斑的选择,曝光时间的选择,对于合轴准确性的把握,以及对于外界影响照相质量因素的考虑,以及照完像后的后期处理等等,都会造成同一样品不同的结果。而LaB6相对于w灯丝的优势是要到高倍下才能体现出来。对于生物样品的观察一般都在100k以下,许多工作都是在10~20k,如何提高衬度是应该特别考虑的,对吗?所以针对于搞生物的电镜一般都是配备的高衬度极靴。
kutoku
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除了场发射电镜,两种灯丝都可以互换,1230也一样。而你考虑的真空问题,DP泵是可以满足LaB6要求的1X10-4Pa的,不管什么灯丝,样品的抽气时间不要超过10分钟。最好配有ACD,这样可有效的提高一部分真空度。如果没有PEG的话,应该配一个,这样才可以准确地知道真空值。
而对于你所说小于25K的生物图像,两种灯丝是应该看不出区别来的。你提到的用LaB6看到了双层膜边缘,我想这极有可能是由于不同的操作者的手法不同,像光阑的选择,光斑的选择,曝光时间的选择,对于合轴准确性的把握,以及对于外界影响照相质量因素的考虑,以及照完像后的后期处理等等,都会造成同一样品不同的结果。而LaB6相对于w灯丝的优势是要到高倍下才能体现出来。对于生物样品的观察一般都在100k以下,许多工作都是在10~20k,如何提高衬度是应该特别考虑的,对吗?所以针对于搞生物的电镜一般都是配备的高衬度极靴。
MN,那是不是极靴的性质很大程度上制约了图像的清晰程度及反差效果?我目前使用的电镜是分析型的1230,以前用的2100是高反差,高分辨的极靴,最最最早接触的IEM-100X听说是反差最好的一种型号,这么比较下来只有现在的电镜照不出细胞器双膜结构,所以我只能想是不是因为灯丝或者极靴的关系(是用的同一张样品,同样的拍照手法),请赐教
黑洞
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原文由 kutoku 发表:
MN,那是不是极靴的性质很大程度上制约了图像的清晰程度及反差效果?我目前使用的电镜是分析型的1230,以前用的2100是高反差,高分辨的极靴,最最最早接触的IEM-100X听说是反差最好的一种型号,这么比较下来只有现在的电镜照不出细胞器双膜结构,所以我只能想是不是因为灯丝或者极靴的关系(是用的同一张样品,同样的拍照手法),请赐教

坦率地说,不同极靴反差效果有多大差异我没有比较过,但它肯定没有OL AP带来的效果明显。关于清晰程度如果不是接近极限分辨率的话所拍的图像的细节不应有太大差异。再有2100的机靴要么是高反差,要么是高分辨,不会有你提到的那种机靴。1230分析型的晶格分辨率是0.2nm, 点分辨率在0.4nm, 2100高反差的晶格分辨率是0.14nm, 点分辨率在0.31nm(这些数据可以从jeol的网站上查到), 所以在X25k情况下,拍摄不出你所说的细胞器双膜结构,即使比这个倍数再高出许多,也不应该是由于机靴,或机型,更不是灯丝原因所致,肯定另有它因。我这里提出几个建议供参考:
1,确认电压中心和物镜像散。
2,你使用底片拍照,还是使用CCD?如果是CCD,先假设你原来使用2100是794(肯定不会是792的),而现在1230使用的是792,那他们所反映出来的图像细节也是有很大差异的。如是这样的话,建议你用底片拍几张试试。
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