主题：【资料】如何延长液相色谱柱的使用寿命（二）使用过程中的维护

使用过程指的是色谱柱分析样品的过程。
1.流动相的使用和分析方法的选择
流动相的纯度、溶剂的选择、适当分析方法的使用与色谱柱的性能和寿命密切相关。
1.1流动相的选择
所选用的流动相应与色谱柱、待分析样品相兼容，即样品、样品溶液和流动相是互溶的。流动相能够溶解样品，避免样品沉淀析出；同时还要求流动相与样品不发生化学反应，并且要求与色谱柱不能发生溶解或化学反应。
色谱分析应选择色谱级的流动相。通常分析纯的溶剂含有微量杂质，如有机溶剂中的聚乙二醇、无机铁离子（Fe⁺）等，作为流动相大量使用后会引起色谱柱性能变化。最好是使用色谱纯级或者更高纯度的试剂，尽量降低溶剂中杂质带来的损伤。
1.2流动相过滤
使用色谱纯试剂配制流动相，使用前需经0.45 μm或者更小孔径的滤膜过滤和超声脱气处理，减少灰尘、微生物等杂质堵塞色谱柱，尤其是水溶性流动相易引起微生物生长而造成色谱柱阻塞。流动相最好是现配现用，放置时间最好不要超过2天。
1.3流动相的pH和缓冲盐的选择
极端pH的流动相会破坏填料内的共价键，“溶解”硅胶，使键合相流失，从而降低柱效，缩短使用寿命。以硅胶作基质的固定相一般要求pH在2.5~7范围内使用。长期在pH > 7或 pH < 2 使用环境中，硅胶会逐渐溶解或者表面键合的官能团会逐渐流失。如果一定要用高或低pH的流动相，最好是选用相适应的色谱填料。
1.4 流速的控制
目前粒径为1.8μm 的UPLC的流速常设为0.3~0.5 mL/min，粒径为5 μm的HPLC分析流速不大于1.5mL/min，粒径为10μm半制备柱流速控制在3 mL/min。流速过大，压力升高，会引起色谱填料冲垮、塌陷。
2. 色谱仪器的操作
每次开机使用分析仪器时，泵启动太快，流速和柱压的瞬间升高，柱床受到冲击，引起紊乱，产生空隙，影响色谱柱的使用寿命。因此，在操作实验开始时，应当将流速和柱压逐渐增加。
3.保护柱的使用
“保护柱”是与所使用液相色谱柱相同填料的短型色谱柱，可以有效地阻拦容易损坏色谱柱的大分子和不溶性颗粒，过滤易沉着色谱柱上产生死吸附的物质，从而延长色谱柱使用寿命。
4.柱温的控制
不同类型的色谱柱耐受的温度各有差别。通常色谱柱温维持在10～40oC之间，能够充分、最优的发挥色谱柱的性能。超出色谱柱温度范围，尤其高于柱温范围，会增加对流动相中化学物质的吸附，引起色谱柱固定相结构的改变；此外，还可能引起柱床塌陷，改变峰形，降低柱效，产生不可逆性的损伤。